Anticorps monoclonal de lapin anti-ERAP1 pour WB, IHC-P, ELISA - Q9NZ08

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d’ERAP1

• ERAP1 (aminopeptidase 1 du réticulum endoplasmique) est une enzyme essentielle de l’immunité adaptative, qui raccourcit les peptides précurseurs antigéniques à des longueurs optimales (8 à 10 résidus) pour leur chargement sur les molécules du CMH de classe I.
• Elle présente une forte préférence pour la longueur des substrats, traitant efficacement les peptides de 9 à 16 acides aminés, et cesse généralement le raccourcissement après avoir généré un peptide de 9 acides aminés.
• Elle hydrolyse préférentiellement la leucine et les peptides comportant des extrémités C-terminales hydrophobes, tout en présentant une faible activité envers les résidus terminaux chargés, contribuant ainsi à façonner l’immunopeptidome.
• Au-delà du traitement des antigènes, ERAP1 inactive l’angiotensine II et génère de la bradykinine, ce qui suggère un rôle dans la régulation de la pression artérielle au niveau rénal.
• La protéine se localise dans la membrane du réticulum endoplasmique, où elle est ancrée par un peptide signal N-terminal et un domaine transmembranaire.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, ce qui reflète son rôle constitutif dans le renouvellement des peptides.
• Elle possède des caractéristiques structurales clés : un domaine de métalloprotéase liant le zinc, des ponts disulfure et des sites de N-glycosylation ; elle est classée parmi les protéases, les hydrolases et les protéines liées à l’immunité.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène (a.a. 842-941) cible une région C-terminale ; vérifiez que cet épitope est accessible dans votre échantillon cible, dans des conditions natives et dénaturantes.
• Pour le Western blot, utilisez des conditions réductrices et attendez-vous à observer une bande à environ 107 kDa ; confirmez la spécificité à l’aide de lysats issus d’une extinction ou d’une invalidation génique.
• En IHC sur paraffine, testez différentes méthodes de récupération antigénique (induite par la chaleur, pH 6 ou pH 9), car ERAP1 est une protéine membranaire ; effectuez une contre-coloration pour évaluer la morphologie tissulaire.
• Une réactivité croisée avec l’ERAP1 de souris et de rat est observée, mais l’homologie de séquence dans la région immunogène doit être vérifiée si vous utilisez d’autres espèces ; validez le résultat dans votre système.
• Les performances en ELISA dépendent du format de revêtement ; envisagez d’utiliser l’anticorps pour la capture ou la détection, et associez-le à un anticorps secondaire compatible pour les dosages en sandwich.

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