Anticorps polyclonal Anti-EPPIN pour WB, ELISA - O95925

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EPPIN

• L'EPPIN (Inhibiteur de protéase épididymaire), également connu sous le nom d'antigène cancer/testicule 71 (CT71), est un membre de la famille du domaine à quatre ponts disulfure WAP (WFDC7) et contient à la fois des domaines Kunitz et WAP.
• Il fonctionne comme un inhibiteur de sérine protéase critique pour la fertilité masculine, modulant l'hydrolyse de la séménogéline-1 (SEMG1) par l'antigène spécifique de la prostate (PSA/KLK3). L'EPPIN se lie à la SEMG1, inhibant la mobilité des spermatozoïdes et assurant une protection antimicrobienne dans le coagulat éjaculé.
• L'EPPIN est localisé à la surface cellulaire et sécrété, recouvrant la surface des spermatozoïdes testiculaires et éjaculés. Il est exprimé par les cellules de Sertoli dans le testicule et les cellules épithéliales dans l'épididyme.
• La protéine présente un épissage alternatif, produisant l'isoforme 2 qui est exprimée spécifiquement dans l'épididyme.
• Les caractéristiques structurelles clés incluent de multiples ponts disulfure, caractéristiques du domaine WAP, contribuant à sa stabilité et à sa fonction.
• L'EPPIN possède une activité antimicrobienne, protégeant les spermatozoïdes dans le coagulat éjaculé.
• L'expression spécifique aux tissus prédomine dans le testicule et l'épididyme, avec une faible expression dans les cellules myoïdes et les cellules spermatogéniques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été élevé contre une protéine recombinante correspondant à la région N-terminale (aa 22-133) de l'EPPIN humaine, qui englobe les domaines Kunitz et WAP. Cette région est conservée entre les espèces, ce qui est cohérent avec la réactivité croisée observée avec la souris et le rat.
• Pour le Western blotting, l'EPPIN endogène est détectée à environ 15 kDa ; envisagez d'optimiser la préparation des échantillons à partir de lysats de tissus testiculaires ou épididymaires.
• Pour les applications ELISA, validez l'anticorps en format direct ou sandwich en utilisant l'EPPIN recombinante ou des fluides biologiques tels que le plasma séminal.
• En raison de la nature sécrétée de l'EPPIN, les surnageants de culture cellulaire de lignées cellulaires de Sertoli ou épididymaires peuvent constituer des sources adaptées pour la détection.

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