Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-EPHA5 pour WB, IF/ICC, ELISA - P54756

Spécifications et Paramètres Essentiels du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'EPHA5

• Le récepteur de type éphrine A5 (EPHA5), également connu sous le nom d'EHK-1, EK7 ou TYRO4, est un membre de la sous-famille des récepteurs à éphrine des récepteurs tyrosine kinases qui se lient aux ligands éphrine-A ancrés par GPI, l'EFNA5 étant probablement son ligand cognat principal.
• Lors de la liaison du ligand, l'EPHA5 médie une signalisation bidirectionnelle dépendante du contact : une signalisation directe via le récepteur et une signalisation inverse via le ligand éphrine, orchestrant des processus développementaux critiques.
• L'EPHA5 fonctionne comme une molécule de guidage axonal, essentielle à la formation des voies rétinotectales, entorhino-hippocampiques et hippocampo-septales pendant le développement du système nerveux.
• Dans le cerveau adulte, l'EPHA5 contribue à la plasticité synaptique en régulant la synaptogenèse, soulignant son rôle au-delà du développement embryonnaire.
• Au-delà du système nerveux, l'interaction EPHA5 et EFNA5 médie la communication entre les cellules des îlots pancréatiques, régulant la sécrétion d'insuline stimulée par le glucose (Par similarité).
• Au niveau subcellulaire, l'EPHA5 se localise à la membrane cellulaire et est enrichi dans les projections cellulaires telles que les axones et les dendrites, ce qui est cohérent avec son rôle dans la connectivité neuronale.
• La protéine est exprimée presque exclusivement dans le système nerveux, notamment dans les neurones corticaux, les cellules de Purkinje du cervelet et les neurones pyramidaux, avec un gradient d'expression croissant du prosencéphale au rhombencéphale et à la moelle épinière.
• L'EPHA5 subit un épissage alternatif et des modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation et la phosphorylation, caractéristiques communes aux récepteurs tyrosine kinases qui modulent l'activité de signalisation.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène englobe la région N-terminale (acides aminés 1-130) de l'EPHA5 humain, qui comprend le peptide signal et une partie du domaine de liaison au ligand éphrine ; cette conception peut offrir une spécificité pour la portion extracellulaire du récepteur.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 115 kDa ; en raison de la glycosylation, la bande observée peut apparaître légèrement plus élevée. Envisagez d'utiliser des lysats de contrôle positif provenant de tissu cérébral ou de lignées cellulaires neuronales (par exemple, SH-SY5Y) connues pour exprimer l'EPHA5.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), l'EPHA5 devrait se localiser à la membrane cellulaire et dans les projections neuronales telles que les axones et les dendrites. Validez les profils de marquage dans des neurones primaires en culture ou des lignées cellulaires neuronales, et incluez des contrôles appropriés pour confirmer la spécificité.
• Les applications ELISA peuvent être utilisées pour détecter l'EPHA5 dans des lysats cellulaires ou des homogénats de tissus ; cependant, une optimisation des conditions de revêtement et de détection est recommandée en fonction de la matrice de l'échantillon.
• Étant donné la réactivité croisée avec la souris et le rat, cet anticorps convient aux études sur des modèles rongeurs, mais confirmez les niveaux d'expression dans le tissu cible, car l'EPHA5 présente des gradients spécifiques à la région dans le système nerveux.

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