Anticorps polyclonal Anti-EPHA3/EPHA4/EPHA5 pour IHC-P, IF/ICC, ELISA - P29320 / P54764 / P54756

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'EPHA3/EPHA4/EPHA5

• EPHA3 (récepteur de l'éphrine de type A 3) est une tyrosine kinase réceptrice appartenant à la sous-famille des récepteurs de l'éphrine. Il est également connu sous les noms EK4, HEK, TYRO4 et ETK1. L'anticorps reconnaît EPHA3, ainsi que les récepteurs EPHA4 et EPHA5 étroitement apparentés, en raison d'épitopes conservés dans la région C-terminale.
• Lorsqu'il se lie aux ligands éphrine-A sur les cellules adjacentes, EPHA3 médie une signalisation bidirectionnelle : une signalisation directe via son domaine kinase intracellulaire et une signalisation inverse via le ligand éphrine. Cette communication dépendante du contact régule l'adhésion cellule-cellule, la dynamique du cytosquelette et la migration cellulaire. Références associées : PMID:11870224
• EPHA3 se lie préférentiellement à l'éphrine-A5 (EFNA5), mais interagit également avec l'éphrine-A1 (EFNA1). L'activation par EFNA1 inhibe la transition épithélio-mésenchymateuse dans les cellules cardiaques, contribuant au développement normal du cœur. Références associées : PMID:12794130
• Le récepteur se localise à la membrane cellulaire et peut également être trouvé sous forme sécrétée. C'est une protéine membranaire de type I à un seul passage avec un domaine extracellulaire de liaison au ligand, une région riche en cystéine, deux répétitions de type fibronectine III, un segment transmembranaire et un domaine tyrosine kinase intracellulaire.
• EPHA3 est largement exprimé, avec les niveaux les plus élevés observés dans le placenta, et joue un rôle dans la cartographie rétinotectale des neurones et la ségrégation des axones moteurs et sensoriels lors du développement des circuits neuromusculaires.
• Les caractéristiques structurelles clés incluent les activités de liaison à l'ATP et de transférase, la N-glycosylation et la phosphorylation. La protéine pleine longueur a un poids moléculaire calculé d'environ 110 kDa.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps est un peptide synthétique dérivé d'une région conservée (acides aminés 700-800) partagée par l'EPHA3, l'EPHA4 et l'EPHA5 humains. Cette conception contribue probablement à la réactivité croisée démontrée avec les orthologues de souris et de rat.
• Pour l'IHC-P, envisagez d'optimiser la méthode de démasquage antigénique et la dilution de l'anticorps. La validation doit être effectuée sur des échantillons de tissus connus pour exprimer des membres de la famille EPHA, tels que le placenta ou les tissus neuronaux.
• Pour l'IF/ICC, des protocoles de perméabilisation peuvent être nécessaires pour détecter les épitopes intracellulaires. Incluez des contrôles appropriés, tels que des cellules avec une expression confirmée d'EPHA.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour détecter les protéines EPHA3/4/5 recombinantes ou natives. Assurez-vous que l'antigène de revêtement et le système de détection sont compatibles avec un anticorps polyclonal de lapin.

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