Anticorps polyclonal de lapin anti-EPB41 pour WB, IP, ELISA - P11171

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EPB41

• La protéine 4.1 (EPB41, 4.1R) est une protéine structurelle multifonctionnelle identifiée à l'origine comme un composant majeur du squelette de la membrane érythrocytaire.
• Elle stabilise le réseau spectrine-actine, régulant ainsi la stabilité mécanique et la déformabilité des globules rouges.
• Dans les cellules non érythrocytaires, l'EPB41 est nécessaire pour le recrutement cortical du complexe dynéine-dynactine et de NUMA1 lors de l'anaphase, assurant une progression mitotique correcte (PubMed:23870127).
  Références connexes :
  PMID:23870127
• L'EPB41 interagit avec la calmoduline et contient des sites de liaison pour l'actine, la spectrine et d'autres protéines associées à la membrane, et subit un épissage alternatif étendu pour générer de multiples isoformes.
• Les modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation et la O-glycosylation, régulent son association avec le cytosquelette et la membrane.
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le cortex cellulaire, le cytosquelette et le noyau, reflétant ses divers rôles fonctionnels.
• Les mutations de l'EPB41 sont associées à l'elliptocytose héréditaire et à la pyropoïkilocytose, des anémies hémolytiques caractérisées par des érythrocytes de forme anormale et fragiles.
• La protéine a un poids moléculaire d'environ 97 kDa.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blotting, attendez-vous à une bande autour de 97 kDa ; validez l'expression dans des lysats d'érythrocytes ou des lignées cellulaires nucléées pertinentes.
• Lors de l'immunoprécipitation, utilisez des tampons de lyse appropriés qui préservent les interactions du cytosquelette ; envisagez une étape de centrifugation à faible vitesse pour pré-nettoyer le lysat.
• Puisque l'immunogène est un peptide de la région des acides aminés 700–800, la spécificité peut être confirmée par un knockdown médié par l'ARNsi ou en comparant avec une lignée cellulaire n'exprimant pas l'EPB41.
• Pour l'ELISA, optimisez les conditions de revêtement et envisagez d'utiliser des fragments de protéines recombinantes comme standards.
• Cet anticorps polyclonal peut reconnaître plusieurs isoformes de l'EPB41 en raison de l'épissage alternatif ; vérifiez l'identité des bandes détectées par spectrométrie de masse ou par sondes spécifiques aux isoformes.

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