Anticorps polyclonal de lapin anti-eIF4EBP1 pour IHC-P et ELISA - Q13541

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’eIF4EBP1

• La protéine 1 de liaison au facteur d’initiation de la traduction eucaryote 4E (eIF4EBP1), également connue sous le nom de PHAS-I, est un répresseur clé de l’initiation de la traduction dépendante de la coiffe. Elle agit en se liant à la sous-unité eIF4E et en empêchant son assemblage au sein du complexe eIF4F.
• L’eIF4EBP1 hypophosphorylée entre en compétition avec la protéine d’échafaudage eIF4G pour un site de liaison commun sur eIF4E, inhibant ainsi la traduction. L’hyperphosphorylation en réponse aux facteurs de croissance, aux hormones ou aux nutriments dissocie l’eIF4EBP1 d’eIF4E, permettant la formation du complexe eIF4F et l’initiation de la traduction.
• L’activité de l’eIF4EBP1 est principalement régulée par les voies de signalisation mTORC1 et MAP kinase, qui intègrent les signaux extracellulaires et intracellulaires afin de contrôler la synthèse protéique.
• L’eIF4EBP1 est majoritairement localisée dans le cytoplasme, mais peut également être détectée dans le noyau, ce qui concorde avec ses fonctions dans la régulation de la traduction et éventuellement dans l’exportation d’eIF4E.
• Les modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation sur plusieurs sites, l’acétylation et l’ubiquitination, modulent dynamiquement son affinité pour eIF4E ainsi que ses fonctions régulatrices.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène a été conçu contre la région N-terminale (acides aminés 1-118) de l’eIF4EBP1 humain, qui couvre une région essentielle pour la liaison à eIF4E et la régulation dépendante de la phosphorylation. Cela suggère que l’anticorps pourrait reconnaître à la fois les formes phosphorylées et non phosphorylées, mais une validation dans le système d’échantillon concerné est recommandée.
• Pour les applications d’IHC-P, envisagez des conditions de récupération antigénique adaptées aux antigènes nucléaires et cytoplasmiques, et incluez des contrôles tissulaires appropriés (par exemple, des tissus présentant une expression connue élevée/faible de l’eIF4EBP1). La réactivité croisée avec la souris et le rat indique une utilité potentielle chez ces espèces.
• Pour l’ELISA, utilisez une protéine eIF4EBP1 recombinante ou des lysats cellulaires comme antigènes de revêtement, et testez les dilutions de l’anticorps selon un format en damier. Comme il s’agit d’un pAb polyclonal de lapin, le signal peut varier d’un lot à l’autre.
• En tant qu’anticorps polyclonal, il offre une large reconnaissance des épitopes, ce qui peut être avantageux pour détecter plusieurs isoformes ou modifications, mais peut également nécessiter un blocage soigneux et une sélection appropriée de l’anticorps secondaire afin de minimiser le bruit de fond.

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