Anticorps monoclonal de lapin anti-eIF4EBP1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q13541

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'eIF4EBP1

• eIF4EBP1 est un répresseur de l'initiation de la traduction qui entre en compétition avec eIF4G1/eIF4G3 pour la liaison à eIF4E, la protéine se liant à la coiffe des ARNm. L'eIF4EBP1 hypophosphorylé se lie fortement à eIF4E, empêchant son incorporation dans le complexe eIF4F et inhibant la traduction dépendante de la coiffe.
• L'hyperphosphorylation d'eIF4EBP1 en réponse à des stimuli tels que les facteurs de croissance et les hormones entraîne sa dissociation d'eIF4E, permettant l'assemblage d'eIF4F et l'initiation de la traduction. Cette régulation implique les voies de signalisation MAP kinase et mTORC1.
• Également connu sous le nom de PHAS-I (protéine phosphorylée stable à la chaleur et acide régulée par l'insuline 1), eIF4EBP1 est un médiateur clé reliant les signaux extracellulaires au contrôle de la synthèse protéique.
• La protéine est localisée à la fois dans le cytoplasme et le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle dans la régulation de la traduction et potentiellement d'autres fonctions nucléaires.
• eIF4EBP1 est soumis à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination, qui ajustent finement son activité et sa stabilité.
• En tant que membre de la famille des protéines de liaison à eIF4E, eIF4EBP1 partage des similitudes structurelles et fonctionnelles avec les autres 4E-BP, mais présente des caractéristiques réglementaires distinctes.

Conseils expérimentaux et indications techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-100) de l'eIF4EBP1 humain ; par conséquent, l'anticorps peut reconnaître préférentiellement les fragments de pleine longueur et N-terminaux. Envisagez une récupération d'antigène ou des conditions dénaturantes pour une exposition optimale si vous ciblez des épitopes internes dans des échantillons fixés.
• Pour le Western blot, eIF4EBP1 a un poids moléculaire prédit d'environ 13 kDa, mais des modifications post-traductionnelles (par exemple la phosphorylation) peuvent entraîner l'apparition de plusieurs bandes ou un décalage de migration. Validez dans le système d'échantillon concerné et incluez des inhibiteurs de phosphatase si l'état de phosphorylation est critique.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, effectuez une fixation et une perméabilisation appropriées pour accéder aux pool cytoplasmiques et nucléaires. Incluez des contrôles pour confirmer la spécificité.
• Pour l'ELISA, associez-le à un anticorps de capture ou de détection adapté pour construire un test sandwich, en tenant compte de la région d'épitope linéaire reconnue.

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