Anticorps monoclonal de lapin anti-eIF4A3 pour WB, IF/ICC, ELISA - P38919

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de eIF4A3

• Encodé par le gène EIF4A3, la protéine est également connue sous le nom d'ARN hélicase dépendante de l'ATP DDX48, protéine de la matrice nucléaire 265 (NMP265) et facteur d'initiation eucaryote 4A-III.
• C'est un composant intégral du spliceosome, essentiel pour l'épissage des pré-ARNm. Références associées : PMID:11991638, PMID:22961380, PMID:28076346
• Il agit comme une ARN hélicase dépendante de l'ATP, facilitant le déroulement dépendant de l'ATP des structures secondaires d'ARN pendant l'épissage des pré-ARNm et d'autres processus. Références associées : PMID:16170325
• C'est un composant central du complexe de jonction d'exon (EJC), déposé sur l'ARNm au niveau des jonctions d'épissage pour marquer les limites exon-exon et influencer les processus post-épissage tels que l'export nucléaire, la localisation subcellulaire, l'efficacité de la traduction et le décours d'ARNm médié par le non-sens (NMD). Références associées : PMID:16170325, PMID:16209946, PMID:16314458
• L'activité hélicase est stimulée par CASC3 et inhibée par l'hétérodimère MAGOH-RBM8A, qui stabilise l'EJC sur l'ARNm épissé dans une conformation liée à l'ATP.
• Il module l'épissage alternatif de gènes apoptotiques comme BCL2L1, inhibant la production de l'isoforme proapoptotique Bcl-X(S). Références associées : PMID:22203037
• Il est impliqué dans le développement craniofacial. Références associées : PMID:24360810
• Subcellulairement, il se localise dans le noyau, les speckles du nucléoplasme et le cytoplasme. Il est exprimé de manière ubiquiste et soumis à des modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 34–125 de l'eIF4A3 humain ; par conséquent, l'anticorps reconnaît probablement un épitope N-terminal conservé. Envisagez de vérifier la spécificité avec une protéine recombinante ou des lysats de cellules surexprimant eIF4A3.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 47 kDa. Utilisez des lysats de cellules entières de lignées cellulaires humaines (HeLa, HEK293), de souris ou de rat comme contrôles positifs. Validez dans votre système d'échantillon spécifique.
• En immunofluorescence/ICC, attendez une coloration nucléaire (avec un motif moucheté) et potentiellement cytoplasmique. Des études de colocalisation avec des marqueurs de spliceosome ou d'EJC peuvent confirmer la spécificité de la cible.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé avec l'immunogène ou la protéine eIF4A3 purifiée. Établissez les conditions optimales de revêtement et de détection de manière empirique.

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