Anticorps polyclonal de lapin anti-eIF4A pour WB, IF/ICC, ELISA - P60842 / Q14240 / P38919

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'eIF4A

• L'eIF4A-1 (P60842), également connu sous le nom de DDX2A, est une hélicase à ARN dépendante de l'ATP et une sous-unité centrale du complexe d'initiation de la traduction eIF4F.
• En tant que composant de l'eIF4F, l'eIF4A-1 participe à l'initiation de la traduction dépendante de la coiffe en déroulant les structures secondaires de l'ARN dans la région 5'-UTR des ARNm, permettant ainsi la liaison du ribosome et le balayage du codon de démarrage.
  Références associées : PMID:20156963
• Cette activité hélicase est essentielle à une synthèse protéique efficace et contribue à la prolifération et à la croissance cellulaire.
• La famille eIF4A se compose de trois membres hautement homologues : eIF4A-1 (P60842), eIF4A-2 (Q14240) et eIF4A-3 (P38919), partageant tous des domaines hélicases DEAD-box conservés.
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, la région périnucléaire, la membrane cellulaire et les granules de stress, où il est recruté en cas de stress cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination régulent son activité et sa stabilité.
• L'eIF4A-1 est également impliqué dans les interactions hôte-virus, jouant un rôle dans la réplication de certains virus.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant la région N-terminale (aa 1-100) de l'eIF4A-1 humain. L'anticorps polyclonal résultant peut reconnaître plusieurs membres de la famille eIF4A en raison de la forte conservation des séquences ; pensez à vérifier la spécificité pour votre isoforme cible dans le lysat cellulaire ou tissulaire approprié.
• Pour le Western Blot, une bande dominante autour de 46 kDa est attendue pour l'eIF4A-1, avec d'éventuelles bandes supplémentaires correspondant à l'eIF4A-2 (environ 46 kDa) et à l'eIF4A-3 (environ 48 kDa). Utilisez des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En immunofluorescence/ICC, un marquage peut être observé dans le cytoplasme et le noyau, avec un enrichissement possible dans la région périnucléaire ou dans les granules de stress dans des conditions de stress. Un prétraitement des cellules pour induire la formation de granules de stress (par exemple avec de l'arsénite) peut être utilisé pour les études de localisation.
• Pour l'ELISA, l'anticorps est adapté comme réactif de capture ou de détection dans les formats sandwich ; la réactivité croisée avec d'autres protéines de la famille eIF4A doit être évaluée empiriquement.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la performance constante entre les lots doit être validée ; envisagez d'utiliser des étalons de référence internes pour les dosages quantitatifs.

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