Anticorps polyclonal anti-eIF3B pour WB, IF/ICC, ELISA - P55884

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'eIF3B

• L'eIF3B est une sous-unité centrale du complexe du facteur d'initiation de la traduction eucaryote 3 (eIF-3), qui est essentiel pour plusieurs étapes de l'initiation de la synthèse des protéines, notamment la formation du complexe de pré-initiation 43S, le recrutement et le balayage de l'ARNm, ainsi que le démontage et le recyclage des complexes ribosomiques post-terminaison. Références connexes : PMID:17581632 PMID:25849773 PMID:27462815 PMID:9388245
• Le complexe eIF-3 cible spécifiquement et régule la traduction d'un sous-ensemble d'ARNm impliqués dans la prolifération cellulaire, la différenciation et l'apoptose, employant différents modes de liaison aux tiges-boucles d'ARN pour activer ou réprimer la traduction. Références connexes : PMID:25849773
• L'eIF3B est une protéine liant l'ARN qui contribue au recrutement des facteurs d'initiation (eIF-1, -1A, -2:GTP:Met-tRNAi, -5) vers la sous-unité ribosomique 40S, facilitant la formation du complexe de pré-initiation 43S. Références connexes : PMID:17581632 PMID:25849773 PMID:27462815
• Au niveau subcellulaire, l'eIF3B se trouve dans le cytoplasme et peut se localiser dans les granules de stress, suggérant des rôles dans le contrôle traductionnel dans des conditions de stress.
• Dans le contexte de l'infection microbienne, l'eIF3B joue un rôle dans la traduction du calicivirus félin (FCV) en participant à un événement de terminaison-réinitialisation ribosomique qui conduit à la synthèse de la protéine VP2. Références connexes : PMID:18056426
• Les modifications post-traductionnelles de l'eIF3B comprennent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler sa fonction ou l'assemblage du complexe.
• La protéine est caractérisée par la présence de répétitions WD, qui sont impliquées dans les interactions protéine-protéine, et elle subit un épissage alternatif, produisant des isoformes.
• L'eIF3B est également connu sous le nom d'homologue PRT1, eIF3S9, eIF-3-eta, eIF3 p110 et eIF3 p116. Le poids moléculaire calculé est d'environ 92,5 kDa, mais elle migre autour de 93 kDa en SDS-PAGE.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le transfert Western (Western blot), une bande d'environ 93 kDa est attendue. Envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux ou des extraits cytoplasmiques d'échantillons humains, de souris ou de rat, et incluez des témoins positifs et négatifs appropriés pour confirmer la spécificité.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), assurez-vous d'une fixation et d'une perméabilisation cellulaires appropriées. Le colorage est principalement cytoplasmique ; dans des conditions de stress, l'eIF3B peut se localiser dans les granules de stress, envisagez donc d'induire un stress pour observer la formation de granules.
• Pour les applications ELISA, la nature polyclonale et la reconnaissance de multiples épitopes peuvent améliorer la sensibilité, mais la variabilité d'un lot à l'autre doit être contrôlée par standardisation.
• Puisqu'il s'agit d'un anticorps polyclonal de lapin dirigé contre l'eIF3B humain, la validation sur la cible endogène dans le système d'échantillonnage prévu est recommandée, en particulier lors du changement d'espèces (humain, souris, rat).
• Bien que non répertorié dans les applications standard, l'anticorps peut convenir pour l'immunoprécipitation du complexe eIF-3 ; cependant, cela doit être testé empiriquement.

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