Anticorps polyclonal anti-EIF3A pour WB, IF/ICC, ELISA - Q14152

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’EIF3A

• L’EIF3A est un composant liant l’ARN du complexe du facteur d’initiation de la traduction eucaryote 3 (eIF-3), requis à plusieurs étapes de l’initiation de la synthèse protéique. Références associées : PMID:17581632, PMID:25849773
• Le complexe eIF-3, qui contient l’EIF3A, facilite le recrutement de eIF-1, eIF-1A, eIF-2:GTP:Met-tRNAi et eIF-5 au ribosome 40S afin de former le complexe de pré-initiation 43S (43S PIC). Références associées : PMID:17581632, PMID:25849773
• L’EIF3A stimule le recrutement de l’ARNm au 43S PIC et le balayage à la recherche du codon AUG, et il est nécessaire à la dissociation et au recyclage des complexes ribosomiques post-terminaison, empêchant l’association prématurée des sous-unités 40S et 60S. Références associées : PMID:11169732, PMID:17581632
• Cette sous-unité cible et initie spécifiquement la traduction d’un sous-ensemble d’ARNm impliqués dans la prolifération, la différenciation et l’apoptose cellulaires, en utilisant différents modes de liaison aux structures en tige-boucle de l’ARN afin d’exercer une activation ou une répression traductionnelle. Références associées : PMID:25849773, PMID:27462815
• Lors d’une infection microbienne, l’EIF3A est essentiel à l’initiation sur les sites internes d’entrée du ribosome viraux de type 1 (IRES), tels que ceux du VHC, du PV, de l’EV71 ou du BEV, et joue un rôle dans l’événement de terminaison-réinitiation ribosomique pour la traduction de VP2 du FCV. Références associées : PMID:23766293, PMID:24357634, PMID:18056426
• L’EIF3A se localise dans le cytoplasme.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation et la phosphorylation ; la protéine contient des motifs en coiled-coil et de liaison à l’ARN, et participe aux interactions hôte-virus.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 1–250 à l’extrémité N-terminale de l’EIF3A humain. Tenez-en compte lors de la conception de réactifs de détection complémentaires ou d’études de cartographie des épitopes.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d’environ 167 kDa. Utilisez des conditions de SDS-PAGE réductrices et validez la bande observée dans vos lysats cellulaires ou tissulaires spécifiques.
• Pour l’immunocytochimie/l’immunofluorescence (IF/ICC), une fixation au paraformaldéhyde à 4 % et une perméabilisation avec 0,1–0,3 % de Triton X-100 sont généralement adaptées. Confirmez les conditions optimales dans votre modèle cellulaire.
• Lors de l’utilisation de l’ELISA, les tampons de revêtement et les systèmes de détection appropriés doivent être optimisés. Envisagez de l’associer à un anticorps de capture validé pour le développement d’un ELISA sandwich.

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