Anticorps monoclonal lapin Anti-EIF2AK1 pour WB, ELISA - Q9BQI3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EIF2AK1

• L'EIF2AK1, également connue sous le nom d'inhibiteur régulé par l'hème (HRI) ou de répresseur contrôlé par l'hème (HCR), est une sérine/thréonine kinase détectant le stress métabolique qui phosphoryle la sous-unité α du facteur d'initiation de la traduction eucaryote 2 (eIF‑2α) sur la sérine 51. Cette phosphorylation convertit l'eIF‑2α en un inhibiteur global de la synthèse des protéines, atténuant ainsi la traduction dépendante de la coiffe et initiant la réponse intégrée au stress (ISR).
  Références connexes : PMID:32132706, PMID:32132707, PMID:37327776

• En tant que capteur d'hème, l'EIF2AK1 lie l'hémine par une coordination thiolate de cystéine et azotée d'histidine avec une affinité modérée, gardant la kinase inactive dans des conditions normales. La déplétion en hème, telle que lors d'une carence en fer, libère cette inhibition, déclenchant l'activation de l'ISR et jouant un rôle crucial dans la coordination de la synthèse de l'hémoglobine dans les globules rouges.

• Lors d'un dysfonctionnement mitochondrial, la forme traitée de DELE1 (S‑DELE1) se lie directement et active l'EIF2AK1, entraînant une reprogrammation transcriptionnelle médiée par ATF4. Cette voie favorise également la mitophagie indépendante de PRKN par phosphorylation de l'eIF‑2α au niveau des mitochondries endommagées.
  Références connexes : PMID:32132706, PMID:32132707, PMID:37327776, PMID:38340717

• Le gène EIF2AK1 subit un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes protéiques. La protéine est modifiée post-traductionnellement par phosphorylation et conjugaison de type ubiquitine, comme l'indiquent les études phosphoprotéomiques et protéomiques.

• La localisation subcellulaire n'est pas explicitement décrite dans l'enregistrement UniProt actuel ; cependant, tous les substrats et partenaires fonctionnels connus se localisent dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec son rôle dans la régulation de la traduction.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Comme l'immunogène correspond aux résidus 337‑586 de l'EIF2AK1 humaine, ce qui englobe une grande partie du domaine kinase, cet anticorps est susceptible de reconnaître à la fois les isoformes de longueur complète et tronquées lorsque cette région est conservée. Pour le Western blot (WB), envisagez d'optimiser la préparation des lysats avec des inhibiteurs de phosphatases et de valider la détection dans des lignées cellulaires avec une expression confirmée de l'EIF2AK1.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; le couplage avec un clone différent ou un anticorps de détection polyclonal peut améliorer la sensibilité du test. Validez le test dans la matrice d'échantillon pertinente.
• Compte tenu de la désignation [KD Validated], l'anticorps a été testé sur des échantillons après knockdown ; effectuer un WB comparatif avec des cellules traitées par siRNA par rapport à des cellules non traitées peut confirmer davantage la spécificité dans votre système.

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