Anticorps polyclonal de lapin anti-eIF2A pour WB, ELISA - Q9BY44

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'eIF2A

• L'eIF2A (facteur d'initiation de la traduction eucaryote 2A), également désigné comme facteur d'initiation de la traduction eucaryote 2A de 65 kDa, est codé par le gène EIF2A chez l'homme. Il a un poids moléculaire d'environ 65 kDa (UniProt : 64990 Da).
• L'eIF2A fonctionne dans les premières étapes de la synthèse des protéines pour un sous-ensemble spécifique d'ARNm. Il dirige la liaison de la méthionyl-ARNt_i aux sous-unités ribosomiques 40S de manière dépendante du codon, contrairement au complexe eIF-2 canonique qui opère via une liaison dépendante du GTP.
• La protéine est largement exprimée dans les tissus, avec des niveaux d'expression plus élevés observés dans le pancréas, le cœur, le cerveau et le placenta, indiquant des rôles potentiels spécifiques aux tissus dans la régulation de la traduction.
• Les caractéristiques structurelles incluent des répétitions WD, qui facilitent les interactions protéine-protéine, et un domaine enroulé en hélice (coiled-coil). L'eIF2A subit un épissage alternatif et des modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation et la phosphorylation.
• Elle est classée parmi les facteurs d'initiation et est impliquée dans la régulation de la traduction. L'identification par protéomique a confirmé sa présence dans les protéomes de référence.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique dérivé de la région N-terminale (acides aminés 1–100) de l'eIF2A humaine. Cette région est relativement conservée ; vérifiez l'identité de la séquence entre les espèces si une réactivité croisée avec d'autres orthologues est anticipée.
• Pour le Western blot, envisagez de tester des dilutions d'anticorps commençant à 1:500 jusqu'à 1:2000 et validez la spécificité de la bande en utilisant des lysats cellulaires avec knockdown ou knockout de l'eIF2A. L'eIF2A endogène migre à environ 65 kDa ; assurez-vous que les marqueurs de poids moléculaire sont appropriés.
• Dans les applications ELISA, optimisez les concentrations de l'antigène de revêtement et de l'anticorps. Incluez des témoins appropriés pour tenir compte de la liaison de fond due à la nature polyclonale de l'anticorps.
• Compte tenu de la large expression tissulaire de l'eIF2A, sélectionnez des lysats de témoins positifs à partir de tissus à forte expression (par exemple, pancréas, cerveau) pour les premières expériences.

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