Anticorps monoclonal de lapin anti-eIF2α pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P05198

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'eIF2α

• eIF2α, codé par le gène EIF2S1, est la sous-unité alpha du facteur d'initiation de la traduction eucaryote 2 (eIF2), également connu sous le nom d'eIF-2A ou eIF-2alpha.
• Le complexe eIF2 forme un complexe ternaire avec le GTP et l'ARNt initiateur, se lie à la sous-unité ribosomale 40S et facilite l'attachement de l'ARNm pour former le complexe de pré-initiation 43S ; après le recrutement de la sous-unité 60S, l'hydrolyse du GTP produit un complexe eIF2-GDP qui nécessite un échange de nucléotides catalysé par eIF2B pour être recyclé. Références associées : PMID:16289705 PMID:38340717
• eIF2α est un régulateur central de la réponse intégrée au stress (ISR) : la phosphorylation par des kinases sensibles au stress (EIF2AK1/HRI, EIF2AK2/PKR, EIF2AK3/PERK et EIF2AK4/GCN2) convertit l'eIF2α en un inhibiteur global de la synthèse protéique, atténuant la traduction dépendante de la coiffe tout en favorisant la traduction d'ARNm spécifiques à l'ISR, tels que les activateurs transcriptionnels ATF4 et QRICH1. Références associées : PMID:19131336 PMID:33384352 PMID:38340717
• Suite à des dommages mitochondriaux, l'eIF2α phosphorylé se relocalise à la surface mitochondriale et active la mitophagie indépendante de PRKN. Références associées : PMID:38340717
• Au niveau subcellulaire, l'eIF2α se trouve dans le cytoplasme, le cytosol, les granules de stress et les mitochondries, ce qui correspond à ses rôles dans la traduction et la signalisation du stress.
• La protéine subit une acétylation et une phosphorylation, et est classée comme un facteur d'initiation, une phosphoprotéine et une protéine liant l'ARN.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1–315) de l'eIF2α humain, qui inclut des domaines critiques pour la formation du complexe eIF2 et des sites de phosphorylation ; cette conception peut offrir une large réactivité entre espèces et la reconnaissance des formes phosphorylées et non phosphorylées.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 36 kDa ; envisagez d'utiliser des pourcentages de gel appropriés et d'inclure des contrôles pertinents, tels que des lysats cellulaires traités avec des inducteurs de stress (par exemple, thapsigargine, tunicamycine), pour observer d'éventuels décalages induits par la phosphorylation.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC) et l'immunohistochimie (IHC-P), validez les profils de marquage dans le cytoplasme et les granules de stress dans des conditions normales et de stress ; assurez-vous d'utiliser des protocoles de perméabilisation et de démasquage antigénique appropriés.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat suggère une adaptabilité aux modèles rongeurs ; cependant, confirmez l'homologie de séquence et validez dans le système expérimental spécifique.

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