Anticorps polyclonal de lapin anti-EGFR [Validé KD] pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P00533

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EGFR

• Le récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR), également désigné proto-oncogène c-ErbB-1 et récepteur tyrosine-protéine kinase erbB-1, est codé par le gène EGFR (noms alternatifs : ERBB, ERBB1, HER1).
• Fonctionne comme une tyrosine kinase réceptrice se liant aux ligands de la famille EGF (EGF, TGFA, AREG, EPGN, BTC, EREG, HBEGF) pour induire la dimérisation du récepteur et l'autophosphorylation, activant ainsi les principales voies en aval, notamment RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC, STATs, et potentiellement NF-κB (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029, PubMed:11116146). Références associées : PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029 PMID:11116146
• Phosphoryle directement des effecteurs en aval tels que RGS16 (augmentant son activité GTPase et le reliant à la signalisation GPCR) et MUC1 (favorisant les interactions SRC et CTNNB1), et régule positivement la migration cellulaire via l'interaction avec CCDC88A/GIV (PubMed:11602604, PubMed:11483589, PubMed:20462955). Références associées : PMID:11602604 PMID:11483589 PMID:20462955
• Un isoforme issu d'un épissage alternatif (isoforme 2) peut fonctionner comme un antagoniste de la signalisation médiée par l'EGF.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire, le réticulum endoplasmique, l'appareil de Golgi, le noyau, les endosomes et les formes sécrétées, reflétant ses rôles dynamiques dans le trafic et la signalisation.
• Exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus humains, l'isoforme 2 étant notamment détecté dans les cancers de l'ovaire.
• Classé comme un proto-oncogène, une tyrosine-protéine kinase et une glycoprotéine transmembranaire ; sert également de récepteur cellulaire hôte pour l'entrée du virus de l'hépatite C (VHC), facilitant l'internalisation virale.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, la glycosylation, l'hydroxylation, la méthylation, la palmitoylation et la conjugaison de type ubiquitine, comme indiqué par les mots-clés UniProt.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène (aa 1021–1210) se situe dans le domaine intracellulaire C-terminal ; par conséquent, l'anticorps peut détecter à la fois la protéine entière et les fragments C-terminaux. Vérifier la spécificité dans les lysats cellulaires ou échantillons tissulaires pertinents.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 134 kDa est attendue ; cependant, la glycosylation et la phosphorylation peuvent provoquer des décalages de mobilité. Inclure des marqueurs de poids moléculaire et valider avec des contrôles positifs et négatifs pour l'EGFR.
• Pour l'IHC-P, les protocoles standard de récupération antigénique (par exemple, tampon citrate pH 6.0) et de blocage doivent être optimisés ; tester avec des tissus connus positifs (par exemple, peau, placenta) et négatifs (par exemple, knockout).
• En IF/ICC, les méthodes de fixation (PFA vs méthanol) affectent la coloration membranaire de l'EGFR ; une détection parallèle avec un marqueur membranaire est recommandée.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; les conditions du dosage (concentration de revêtement, blocage) nécessitent une optimisation individuelle.
• La réactivité croisée est rapportée pour les échantillons humains ; si elle est utilisée dans d'autres espèces, vérifier indépendamment la réactivité en raison des variations potentielles de séquence.

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