Anticorps Monoclonal Lapin Anti-EGFR (Phospho Y1068) pour WB et ELISA - P00533

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'EGFR

• L'EGFR est une récepteur tyrosine kinase qui se lie aux ligands de la famille EGF, déclenchant la dimérisation du récepteur et l'autophosphorylation sur des résidus cytoplasmiques clés, y compris Y1068, pour activer la signalisation en aval (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960). Références connexes : PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• Le récepteur phosphorylé recrute des protéines adaptatrices telles que GRB2, conduisant à l'activation d'au moins quatre cascades de signalisation majeures : RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC et modules STAT (PubMed:27153536). Références connexes : PMID:27153536
• L'EGFR phosphoryle directement d'autres protéines, notamment RGS16 et MUC1, reliant la signalisation EGF aux voies de signalisation des RCPG et d'adhésion cellulaire (PubMed:11602604, PubMed:11483589). De plus, il peut activer la cascade de signalisation NF-kappa-B (PubMed:11116146). Références connexes : PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:11116146
• L'interaction avec CCDC88A/GIV retient l'EGFR à la membrane cellulaire, favorisant la migration cellulaire (PubMed:20462955). Références connexes : PMID:20462955
• Au niveau subcellulaire, l'EGFR est localisé à la membrane cellulaire, au réticulum endoplasmique, à l'appareil de Golgi, au noyau, aux endosomes et peut être sécrété. Cette distribution dynamique soutient ses rôles de signalisation multifacettes.
• Exprimé de manière ubiquitaire, l'isoforme 2 étant également détectée dans les cancers ovariens. L'EGFR fonctionne également comme un récepteur hôte pour l'entrée du virus de l'hépatite C (VHC) dans les hépatocytes.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation (surtout au niveau de Y1068 après liaison du ligand), la glycosylation, l'ubiquitination et la palmitoylation, essentielles pour son activité kinase et la durée de sa signalisation.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique correspondant à la région Y1068 ; pour WB, assurez-vous d'inclure des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver la phosphorylation.
• Pour ELISA, le revêtement avec l'antigène peptidique phosphorylé peut aider à évaluer la spécificité de l'anticorps ; un peptide non phosphorylé peut servir de témoin négatif.
• Cet anticorps a montré une réactivité croisée avec l'EGFR humain et souris, il peut donc être appliqué aux études sur les deux espèces ; cependant, une validation dans le système d'échantillon cible est recommandée.
• Envisagez d'utiliser un contrôle de chargement qui n'est pas affecté par l'état de phosphorylation pour normaliser les signaux WB.
• Compte tenu du poids moléculaire de 134 kDa, ajustez le pourcentage de gel et les conditions de transfert de manière appropriée.

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