Anticorps monoclonal de lapin anti-EGFR (L858R) pour WB, IHC-P, ELISA - P00533

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'EGFR

• L'EGFR est un proto-oncogène appartenant à la famille ErbB des récepteurs à activité tyrosine kinase, également connu sous les noms HER1 ou ErbB-1.
• Il se lie à divers ligands de type EGF (par exemple, EGF, TGF-alpha, HB-EGF), ce qui entraîne la dimérisation du récepteur, son autophosphorylation et l'activation de plusieurs cascades de signalisation majeures, notamment RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC et les STAT. Références associées : PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Active la cascade de signalisation NF-kappa-B. Références associées : PMID:11116146
• Phosphoryle directement RGS16 et MUC1, couplant respectivement la signalisation de l'EGFR à la signalisation des protéines G et aux voies de la bêta-caténine. Références associées : PMID:11602604, PMID:11483589
• Régule la migration cellulaire par interaction avec CCDC88A/GIV, qui retient l'EGFR au niveau de la membrane cellulaire et favorise la signalisation. Références associées : PMID:20462955
• L'isoforme 2 peut agir comme un antagoniste de l'action de l'EGF.
• Se localise principalement au niveau de la membrane cellulaire, mais est également présente dans le réticulum endoplasmique, l'appareil de Golgi, le noyau, les endosomes et sous forme sécrétée.
• Présente une expression ubiquitaire ; l'isoforme 2 est également détectée dans les cancers de l'ovaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à un peptide situé entre les acides aminés 800 et 900 de l'EGFR et contenant la mutation L858R ; confirmer la spécificité du mutant en comparant la réactivité avec l'EGFR de type sauvage.
• Pour le Western blot, utiliser des conditions dénaturantes et réductrices ; une bande proche de 134 kDa est attendue. Valider à l'aide de lysats cellulaires exprimant l'EGFR L858R et de témoins de type sauvage.
• Pour l'IHC-P, optimiser la récupération antigénique et inclure comme contrôle positif un tissu connu pour porter la mutation L858R (par exemple, un adénocarcinome pulmonaire).
• Pour l'ELISA, envisager l'utilisation du peptide immunisant ou de la protéine EGFR L858R recombinante comme étalon, et évaluer la réactivité croisée potentielle avec l'EGFR de type sauvage.

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