Anticorps monoclonal anti-EGF pour WB - P01132

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’EGF

• L’EGF est un facteur de croissance qui stimule in vivo et in vitro la prolifération et la différenciation des tissus épidermiques et épithéliaux, ainsi que de certains fibroblastes en culture cellulaire.
• Il agit comme une hormone magnésiotropique, favorisant la réabsorption du magnésium dans le tubule contourné distal rénal en activant le canal du magnésium TRPM6 par l’intermédiaire de l’activation d’EGFR (par analogie).
• La protéine est synthétisée sous forme de précurseur lié à la membrane (facteur de croissance épidermique pro-épidermique) qui subit un clivage protéolytique pour libérer le facteur de croissance soluble mature.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire, où le précurseur est ancré avant son traitement.
• Contient des domaines de type EGF et plusieurs ponts disulfure essentiels à sa structure tertiaire et à sa liaison au récepteur.
• Classé parmi les processus biologiques clés tels que l’activité des facteurs de croissance, la signalisation transmembranaire et l’homéostasie du magnésium.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le WB, utilisez des lysats de tissus de souris connus pour exprimer l’EGF, tels que le rein ou la glande salivaire. Une bande d’environ 133 kDa est attendue pour le pro-EGF ; des bandes supplémentaires de poids moléculaire inférieur peuvent correspondre aux formes maturées.
• Pour l’ELISA, cet anticorps peut être utilisé dans des formats d’ELISA direct ou indirect ; il est recommandé de l’associer à un anticorps secondaire adapté aux IgG de lapin ou à un anticorps de détection compatible.
• Comme l’immunogène correspond au domaine EGF C-terminal, l’anticorps reconnaît probablement à la fois l’EGF précurseur et l’EGF mature. Validez cette réactivité dans le système d’échantillons concerné.
• Optimisez les conditions de blocage et d’incubation afin de réduire les liaisons non spécifiques, en particulier lors de l’utilisation de tissus de souris.

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