Anticorps polyclonal de lapin anti-eEF2 (EF-2) pour WB, ELISA - P13639

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’eEF2

• Le facteur d’élongation 2 (eEF2) catalyse la translocation ribosomique dépendante du GTP pendant l’élongation de la traduction, en déplaçant le peptidyl-ARNt du site A vers le site P et l’ARNt désacylé du site P vers le site E (PubMed:26593721) Références associées : PMID:26593721
• Cette translocation est couplée au déplacement de l’ARNm et aux changements conformationnels du ribosome afin de provoquer la transition de l’état pré-translocationnel à l’état post-translocationnel (PubMed:26593721) Références associées : PMID:26593721
• L’eEF2 appartient à la superfamille des GTPases des facteurs de traduction de la classe TRAFAC et contient des domaines de liaison au GTP et d’hydrolyse essentiels à sa fonction
• Il est principalement localisé dans le cytoplasme, mais peut également être présent dans le noyau
• Il subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation, l’ADP-ribosylation, la méthylation, la phosphorylation et l’ubiquitination, qui peuvent réguler son activité
• Les mutations du gène EEF2 sont associées à l’ataxie spinocérébelleuse de type 26 (SCA26), une maladie neurodégénérative
• La protéine possède un poids moléculaire calculé d’environ 95,3 kDa, ce qui concorde avec la migration observée à environ 95 kDa en SDS-PAGE

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1–290) de l’eEF2 humaine, ce qui peut permettre la détection de la forme complète et de certaines formes tronquées
• Pour le western blot, la bande attendue est d’environ 95 kDa ; validez les résultats à l’aide de contrôles positifs et négatifs appropriés
• En raison du rôle essentiel de l’eEF2 dans la traduction, les niveaux d’expression peuvent varier selon les conditions de croissance cellulaire ; envisagez d’utiliser des contrôles de charge tels que la β-actine ou la GAPDH
• L’ELISA peut être utilisé pour une détection quantitative ; déterminez empiriquement la dilution optimale de l’anticorps et la plage de linéarité de l’essai
• Pour l’immunofluorescence ou l’IHC, notez que l’eEF2 est principalement cytoplasmique, mais peut également présenter un marquage nucléaire ; utilisez des protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés

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