Anticorps polyclonal de lapin anti-EEA1 pour WB, IHC-P, ELISA - Q15075

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d'EEA1

• EEA1 (antigène 1 de l'endosome précoce), également désignée comme protéine associée à l'endosome p162 ou ZFYVE2, est une protéine d'environ 162 kDa codée par le gène EEA1 chez l'humain.
• Elle agit comme facteur d'attachement en se liant au phosphatidylinositol 3-phosphate (PtdIns(3)P) sur les membranes endosomales, facilitant l'amarrage et la fusion des vésicules au cours du trafic des endosomes précoces.
• La protéine se localise principalement sur la face cytoplasmique des membranes des endosomes précoces et est également présente dans le cytosol, ce qui est cohérent avec son rôle dans la dynamique membranaire.
• EEA1 contient un doigt de zinc C2H2 N-terminal, de vastes domaines en hélice enroulée et un domaine en doigt de zinc FYVE C-terminal qui assure directement la liaison au PtdIns(3)P.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, et la protéine fait l'objet d'une identification protéomique, ce qui indique une large expression dans les tissus.
• Mots-clés : structure 3D, hélice enroulée, cytoplasme, séquençage direct des protéines, endosome, membrane, liaison aux métaux, phosphoprotéine, identification protéomique, protéome de référence, zinc, doigt de zinc.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 1182–1411 de l'EEA1 humain, englobant la région C-terminale qui comprend le domaine FYVE. Cela peut contribuer à une reconnaissance spécifique de la protéine pleine longueur.
• Pour le Western blot, une bande principale proche de 162 kDa est attendue. Utilisez des gels SDS-PAGE à faible pourcentage et prolongez les temps de transfert afin d'améliorer la détection de cette cible de haut poids moléculaire.
• Dans les expériences d'IHC-P, les conditions de récupération antigénique doivent être optimisées pour chaque type de tissu, et des contrôles positifs et négatifs appropriés sont recommandés.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser l'anticorps comme réactif de capture ou de détection après validation avec de l'EEA1 recombinante ou des lysats cellulaires.

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