Anticorps monoclonal de lapin anti-EEA1 pour WB, ELISA - Q15075

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'antigène endosomal précoce 1

• L'antigène endosomal précoce 1 (EEA1), également connu sous le nom de protéine p162 associée aux endosomes ou protéine à domaine FYVE à doigt de zinc 2 (ZFYVE2), est une protéine membranaire périphérique impliquée dans le trafic endosomal.
• L'EEA1 se lie spécifiquement aux vésicules phospholipidiques enrichies en phosphatidylinositol 3-phosphate (PtdIns(3)P), facilitant la fusion et le trafic des endosomes précoces.
• La protéine contient un domaine C-terminal à doigt de zinc FYVE qui la cible vers les membranes des endosomes précoces, ainsi que de vastes domaines enroulés (coiled-coil) qui assurent la dimérisation et l'interaction avec d'autres régulateurs endocytaires.
• Elle est principalement localisée sur la face cytoplasmique des membranes des endosomes précoces, mais peut également être détectée dans le cytosol.
• Les études fonctionnelles montrent que l'EEA1 participe à l'ancrage et à la fusion endosomale dépendants de Rab5, essentiels à la progression correcte de la voie endocytaire.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, et des caractéristiques structurelles telles que les motifs enroulés et le motif de liaison à la calmoduline IQ contribuent à ses rôles régulateurs.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant à la région N-terminale (aa 1-100) de l'EEA1 humain, qui est hautement conservée chez la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• Pour l'analyse par Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 162 kDa ; envisagez d'utiliser un gel SDS-PAGE à 6-8 % et des conditions réductrices standard.
• L'anticorps a été validé par le fournisseur pour le WB et l'ELISA ; pour d'autres applications telles que l'immunofluorescence ou l'immunoprécipitation, une optimisation est recommandée.
• Comme l'EEA1 est associé à la membrane, envisagez d'inclure des détergents doux dans les tampons de lyse pour améliorer la solubilité et la détection de l'antigène.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans votre espèce cible (humain, souris, rat) avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.

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