Anticorps monoclonal anti-EDG1/HEXIM1 pour WB et ELISA - P21453

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'EDG1/HEXIM1

• EDG1/HEXIM1, aussi appelé récepteur de la sphingosine 1-phosphate 1 (S1PR1), récepteur couplé aux protéines G de différenciation endothéliale 1 (EDG1), CD363 et S1P1, est un membre de la famille des récepteurs couplés aux protéines G.
• Il agit comme récepteur pour le lipide bioactif sphingosine 1-phosphate (S1P), se couple aux protéines G(i) pour activer les voies de signalisation en aval impliquant RAC1, SRC, PTK2/FAK1 et les kinases MAP, régulant ainsi la migration cellulaire et la réorganisation du cytosquelette d'actine.
• Le récepteur joue un rôle essentiel dans l'angiogenèse et la maturation vasculaire : il favorise la migration des cellules endothéliales et inhibe la croissance excessive des bourgeons vasculaires au cours du développement des vaisseaux sanguins.
• EDG1/HEXIM1 est indispensable au développement embryonnaire normal du cœur et à la morphogenèse cardiaque, et est nécessaire à la sortie des lymphocytes T matures du thymus vers les organes lymphoïdes périphériques.
• Au niveau sous-cellulaire, il se localise sur la membrane cellulaire, dans les endosomes et les radeaux lipidiques, et subit des modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation, la palmitoylation et la phosphorylation.
• La protéine est majoritairement exprimée dans les cellules endothéliales, avec des niveaux plus faibles dans les cellules musculaires lisses vasculaires, les fibroblastes, les mélanocytes et les cellules d'origine épithélioïde, et elle a un poids moléculaire d'environ 43 kDa.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire N-terminal (acides aminés 1 à 100), ce qui peut contribuer à la spécificité de l'anticorps pour la conformation native du récepteur ; il est recommandé d'utiliser cet anticorps pour détecter le récepteur dans des conditions dénaturantes comme le Western blot.
• La validation de l'anticorps en ELISA indique qu'il peut reconnaître l'épitope linéaire ; pensez à optimiser la concentration d'antigène de revêtement et les conditions de détection pour votre format de dosage spécifique.
• Il est rapporté que l'anticorps a une réactivité croisée avec EDG1/HEXIM1 de souris et de rat ; réalisez des expériences de titrage pour déterminer la dilution de travail optimale pour ces espèces et ces applications.
• Étant donné que le récepteur est une protéine membranaire multi-passante d'un poids moléculaire d'environ 43 kDa, prévoyez d'inclure un agent réducteur et une étape d'ébullition dans votre préparation d'échantillon pour le Western blot, et confirmez la taille de la bande avec des marqueurs de poids moléculaire appropriés.

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