Anticorps polyclonal de lapin anti-EARS2 pour WB, ELISA - Q5JPH6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d’EARS2

• EARS2 code la glutamyl-ARNt synthétase mitochondriale non discriminante (mtGluRS), qui aminoacyle de manière unique les ARNt(Glu) et ARNt(Gln) avec du glutamate, une étape essentielle de la traduction des protéines mitochondriales. Références associées : PMID:19805282
• L’enzyme fonctionne selon un mécanisme en deux étapes dépendant de l’ATP : le glutamate est d’abord activé en Glu-AMP, puis transféré à l’extrémité 3’ des ARNt correspondants. Références associées : PMID:19805282
• EARS2 appartient à la famille des aminoacyl-ARNt synthétases de classe I et contient des domaines conservés impliqués dans la liaison à l’ATP, la liaison à l’ARN et l’activité ligase.
• La protéine se localise dans la matrice mitochondriale, où elle est dirigée par un peptide de transit N-terminal.
• L’épissage alternatif génère plusieurs variants de transcrits, pouvant réguler la fonction enzymatique ou le ciblage mitochondrial.
• Une acétylation post-traductionnelle a été identifiée et pourrait moduler l’activité ou la stabilité.
• Les mutations d’EARS2 sont associées à une maladie mitochondriale primaire, notamment au déficit combiné de la phosphorylation oxydative 12 (COXPD12).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 42–220, une région conservée probablement exposée dans des conditions natives et dénaturées, ce qui rend l’anticorps adapté au WB et à l’ELISA.
• Pour le Western blot, envisagez de charger 20–30 µg de lysat enrichi en mitochondries ou de lysat cellulaire total ; attendez-vous à une bande proche de 59 kDa. Validez dans votre système expérimental, car les modifications post-traductionnelles peuvent entraîner de légers décalages.
• L’anticorps présente une réactivité croisée avec l’EARS2 de souris ; lors de l’utilisation de tissus ou de cellules de souris, vérifiez la spécificité avec des contrôles appropriés (par exemple, des modèles avec knockdown ou knockout).
• Pour l’ELISA, optimisez l’antigène de revêtement (protéine recombinante ou peptide) et la dilution de l’anticorps ; un format ELISA direct peut être utilisé pour évaluer le titre de l’anticorps et son affinité de liaison.
• Conservez les aliquotes à -20 °C ou -80 °C. Évitez les cycles répétés de congélation-décongélation afin de préserver l’activité.

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