Anticorps monoclonal de lapin anti-chaîne intermédiaire 1 de dynéine pour WB, ELISA - Q9UI46

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la chaîne intermédiaire 1 de dynéine

• Le gène DNAI1 code pour la chaîne intermédiaire 1 axonémale de dynéine, une protéine contenant des répétitions WD qui constitue un composant structurel et fonctionnel essentiel du complexe de bras externe de dynéine dans les cils mobiles et les flagelles.
• Cette protéine est indispensable au mouvement ciliaire le long des microtubules, générant la force nécessaire à la clairance mucociliaire dans les voies respiratoires et à la motilité spermatiques.
• Plusieurs isoformes protéiques sont produites par épissage alternatif, ce qui peut contribuer à la régulation tissu-spécifique de l'assemblage et de la fonction de la dynéine dans différents types de cellules ciliées.
• Au niveau protéique, DNAI1 est majoritairement exprimée dans les cellules épithéliales ciliées respiratoires, ce qui correspond à son rôle de protection des voies aériennes contre l'accumulation de pathogènes et de particules.
• Subcellulairement, DNAI1 se localise sur l'ensemble de l'axonème des cils et des flagelles, ancrée aux microtubules doubles externes en tant que composant du complexe moteur de dynéine.
• Les mutations de DNAI1 sont associées à la dyskinésie ciliaire primitive (PCD) et au syndrome de Kartagener, des pathologies caractérisées par des infections respiratoires chroniques, un situs inversus et une infertilité masculine causée par l'immotilité des cils et des spermatozoïdes.
• Les modifications post-traductionnelles, en particulier la phosphorylation, régulent l'activité de la dynéine et la dynamique axonémale, bien que les sites de modification précis sur DNAI1 n'aient pas encore été tous cartographiés.
• La région N-terminale contient des domaines à répétitions WD40 qui médient les interactions protéine-protéine essentielles à l'intégrité du complexe de dynéine et à la génération de force motrice.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour la détection par Western blot, préparez des lysats de lignées cellulaires épithéliales ciliées ou de tissus pour confirmer l'expression endogène ; une bande d'environ 79 kDa est attendue.
• Utilisez des conditions standard de SDS-PAGE (par exemple, gel à 8–10 %) et optimisez le transfert pour les protéines de haut poids moléculaire afin de garantir une détection efficace.
• L'immunogène couvrant les acides aminés 1 à 200 de l'extrémité N-terminale, l'anticorps peut reconnaître plusieurs isoformes ; validez la spécificité à l'aide de contrôles par extinction ou knock-out si disponibles.
• Pour les applications ELISA, revêtez la plaque avec l'immunogène recombinant ou la protéine purifiée et réalisez un titrage de l'anticorps pour établir une concentration de travail adaptée.
• Une réaction croisée avec la souris et le rat étant rapportée, cet anticorps peut être envisagé pour des études sur ces espèces, mais une optimisation adaptée à l'espèce étudiée est recommandée.

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