Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-DR5/TRAILR2/TNFRSF10B pour WB et ELISA - O14763

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de DR5/TRAILR2/TNFRSF10B

• DR5/TRAILR2/TNFRSF10B est un membre de la superfamille des récepteurs du facteur de nécrose tumorale, également connu sous le nom de récepteur de la mort 5 (DR5), KILLER et TRAIL-R2. Il est codé par le gène TNFRSF10B sur le chromosome 8p21.3.
• Le récepteur se lie au ligand cytotoxique TNFSF10/TRAIL, déclenchant l'apoptose par le recrutement de l'adaptateur FADD et de la caspase-8 pour former le complexe de signalisation inducteur de mort (DISC). Références connexes : PMID:10549288
• Suite à la formation du DISC, la caspase-8 est activée par protéolyse, initiant une cascade de caspases qui exécute l'apoptose. La signalisation médiée par DR5 active également NF-kB, le liant aux voies de survie.
• DR5 est essentiel pour l'apoptose induite par le stress du réticulum endoplasmique (RE), soulignant son rôle dans les réponses au stress cellulaire.
• La protéine est une glycoprotéine transmembranaire de type I située à la membrane plasmique. Elle contient des domaines riches en cystéine extracellulaires caractéristiques et un domaine de mort cytoplasmique.
• DR5 est largement exprimé dans les tissus adultes et fœtaux, avec une expression particulièrement élevée dans les lignées cellulaires tumorales (par exemple, HeLa, K-562, HL-60, SW480, A-549, G-361) et dans le cœur, le foie, le pancréas, la rate, le thymus, la prostate, l'ovaire, l'utérus, le placenta et le tractus intestinal ; elle n'est pas détectable dans le cerveau.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, et la protéine subit des modifications post-traductionnelles, y compris la glycosylation et la formation de ponts disulfures, qui sont critiques pour la stabilité du récepteur et la liaison du ligand.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène utilisé pour cet anticorps polyclonal correspond aux acides aminés 260-440 de DR5/TRAILR2/TNFRSF10B humain, ce qui englobe le domaine de mort intracellulaire et une partie de la région cytoplasmique. Cette conception peut convenir pour détecter à la fois les formes complètes et clivées du récepteur.
• Compte tenu de la spécificité pour DR5 humain, les expérimentateurs doivent valider la réactivité croisée s'ils utilisent des échantillons non humains ; le produit est confirmé pour la réactivité humaine.
• Pour le Western blot (WB), les lignées cellulaires à forte expression de DR5 (par exemple, HeLa, K-562, SW480) peuvent servir de témoins positifs, tandis que les tissus cérébraux peuvent être négatifs. Envisagez d'utiliser des conditions de lyse et de réduction appropriées pour observer la bande d'environ 48 kDa.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une optimisation des conditions de revêtement et du système de détection en raison de la localisation membranaire du récepteur ; la protéine DR5 recombinante ou les lysats cellulaires peuvent être explorés comme cibles de capture.
• Puisque DR5 subit un épissage alternatif et une glycosylation, plusieurs bandes ou un smear (trainée) peuvent être observés dans certains échantillons. L'utilisation d'enzymes de déglycosylation ou la confirmation par knockdown siRNA peut aider à valider l'identité de la bande.

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