Anticorps monoclonal de lapin anti-Dopamine bêta Hydroxylase pour WB et ELISA - P09172

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Dopamine bêta-Hydroxylase

• Identité protéique : La Dopamine bêta-hydroxylase (DBH), également connue sous le nom de dopamine bêta-monooxygénase, est codée par le gène DBH chez l'homme et appartient à la famille des monooxygénases dépendantes de l'ascorbate de type cuivre II.
• Fonction principale : DBH catalyse l'hydroxylation de la dopamine en noradrénaline (norepinephrine), une étape fondamentale de la voie de biosynthèse des catécholamines, régulant ainsi l'équilibre des neurotransmetteurs.
• Famille de gènes : DBH est un membre de la famille des monooxygénases ; aucun paralogue étroitement apparenté n'est décrit dans le génome humain, soulignant son rôle unique dans la production de catécholamines.
• Localisation subcellulaire : DBH est principalement localisée dans la lumière et la membrane des vésicules sécrétrices, notamment les granules chromaffines, mais peut également être sécrétée dans l'espace extracellulaire suite à une exocytose.
• Modifications post-traductionnelles et cofacteurs : En tant que glycoprotéine, DBH subit une N‑glycosylation extensive, contient des ponts disulfure essentiels à sa stabilité structurelle, et nécessite des ions cuivre et de la vitamine C (ascorbate) comme cofacteurs pour son activité oxydoréductase.
• Poids moléculaire : Le poids moléculaire calculé du précurseur non glycosylé est d'environ 69 065 Da, ce qui correspond à la bande d'environ 69 kDa observée en SDS‑PAGE en conditions réductrices.
• Associations avec des maladies : Des variations génétiques et des mutations de DBH ont été liées à l'hypotension orthostatique et à d'autres troubles, soulignant sa pertinence clinique (indiquée par le mot-clé "Disease variant" dans UniProtKB).
• Remarques supplémentaires : DBH est également identifiée comme une protéine sécrétée et une entrée de protéome de référence, sa structure 3D étant déterminée et des données de séquençage protéique direct étant disponibles, renforçant ainsi sa caractérisation biochimique.

Guide expérimental et conseils techniques

• Application Western blot : L'anticorps détecte une bande autour de 69 kDa dans des échantillons humains ; envisagez d'utiliser des conditions réductrices et de valider le signal dans des tissus ou types cellulaires connus pour exprimer DBH, tels que la médullosurrénale ou les neurones sympathiques.
• Conception de l'immunogène : Le fragment recombinant couvrant les acides aminés 100–250 correspond à une région conservée du domaine catalytique. L'anticorps peut reconnaître à la fois la forme luminale mature et tout précurseur associé à la membrane présent dans le lysat.
• Considérations ELISA : Lors du développement d'immunodosages en sandwich, testez la compatibilité d'appariement avec un anticorps de capture approprié. Prenez en compte que DBH est sécrétée ; ainsi, une sélection minutieuse du type d'échantillon (par ex., plasma, milieu conditionné) et des étapes de pré‑incubation peuvent améliorer la détection.
• Réactivité croisée : Bien que l'anticorps soit documenté comme réagissant avec la DBH humaine, une réactivité croisée potentielle avec d'autres espèces ou isoformes de DBH doit être vérifiée indépendamment, en particulier si des applications quantitatives sont envisagées.
• Préparation des échantillons : En raison de la double localisation de DBH dans les membranes et les lumières vésiculaires, des stratégies de solubilisation (par ex., détergents doux) ou une fractionnement subcellulaire peuvent être nécessaires pour obtenir un signal optimal dans les tests en phase solide.

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