Anticorps polyclonal de lapin anti-dopamine bêta-hydroxylase (DBH) pour WB et ELISA - P09172

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la DBH

• La DBH (dopamine bêta-hydroxylase) est une monooxygénase contenant du cuivre qui catalyse la conversion de la dopamine en noradrénaline, une étape clé de la biosynthèse des catécholamines.
• Elle est également appelée dopamine bêta-monooxygénase et appartient à la famille des monooxygénases de type II dépendantes de l’ascorbate et du cuivre.
• L’enzyme nécessite de la vitamine C (ascorbate) comme cofacteur ainsi que de l’oxygène moléculaire pour son activité catalytique.
• La DBH est principalement localisée dans les vésicules sécrétoires, notamment les granules chromaffines de la médullosurrénale et les vésicules à cœur dense de grande taille des neurones, où elle se trouve sous des formes solubles et associées à la membrane.
• La protéine est une glycoprotéine comportant des ponts disulfure et une unique hélice transmembranaire, ce qui indique son ancrage à la membrane vésiculaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, et la protéine contient plusieurs sites de liaison au cuivre essentiels à sa fonction enzymatique.
• La DBH est détectable dans le sérum et le liquide céphalorachidien en raison de sa sécrétion par les cellules neuroendocrines, et son activité est souvent utilisée comme marqueur de la fonction du système nerveux sympathique.
• Le gène humain DBH code une protéine de 69 kDa (masse calculée), qui est fortement exprimée dans les neurones adrénergiques et la médullosurrénale.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot, envisagez de tester une gamme de dilutions de l’anticorps (par exemple, de 1:500 à 1:2000) afin d’optimiser le signal. L’immunogène est dérivé de la région N-terminale (aa 1-200) ; tenez donc compte de l’accessibilité de l’épitope selon que vous utilisez des conditions dénaturantes ou non dénaturantes.
• Validez la réactivité de l’anticorps dans des tissus humains, murins et de rat pertinents, car une réactivité croisée est attendue sur la base de l’homologie de séquence dans la région de l’immunogène.
• Pour l’ELISA, un revêtement direct avec l’antigène peptidique ou la protéine DBH recombinante peut être utilisé. Réalisez une expérience pilote afin de déterminer la concentration de revêtement et la dilution de l’anticorps optimales.

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