Anticorps polyclonal de lapin anti-DOG-1/TMEM16A pour WB, ELISA - Q5XXA6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DOG-1/TMEM16A

• ANO1 code pour l'anoctamine-1, un canal chlorure activé par le calcium (CaCC) qui joue un rôle central dans le transport anionique transépithélial et la contraction des muscles lisses. Références associées : PMID:20056604, PMID:22178883, PMID:22946059
• Le canal est indispensable pour l'activité de pacemaker des cellules interstitielles de Cajal (CIC) dans le tractus gastro-intestinal, régulant ainsi la motilité intestinale.
• Dans les cellules épithéliales des voies respiratoires, ANO1 contribue de manière substantielle à la conductance chlorure basale et stimulée et est critique pour le développement du cartilage trachéal.
• Il facilite l'activation et l'expression membranaire de la CFTR en augmentant la libération du stock de Ca²⁺ du réticulum endoplasmique, soulignant son rôle dans le transport chlorure lié à la fibrose kystique. Références associées : PMID:28963502
• ANO1 régule l'expression du mucus des voies respiratoires induite par les interleukines IL3 et IL8 via la protéine associée à l'asthme CLCA1, en régulant positivement MUC5AC ; cependant, des preuves contradictoires indiquent que l'expression de MUC5AC peut ne pas nécessiter ANO1 dans certains contextes. Références associées : PMID:33026825, PMID:31732694
• L'épissage alternatif génère des isoformes avec des sensibilités au calcium et des perméabilités au chlorure distinctes, y compris un variant épithélial des glandes sudoripares avec une perméabilité basale au Cl⁻ accrue et un isoforme hyper-sensible.
• La protéine se localise principalement à la membrane plasmique apicale et aux compartiments présynaptiques, avec une expression tissulaire large comprenant le foie, le muscle squelettique, le muscle lisse gastro-intestinal, les canaux collecteurs rénaux, l'épithélium nasal et les glandes sudoripares eccrines.
• Les modifications post-traductionnelles, telles que la glycosylation, la formation de ponts disulfure et la phosphorylation, sont critiques pour le trafic et la régulation fonctionnelle de l'anoctamine-1.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le western blot, attendez-vous à une bande d'environ 114 kDa dans des conditions réductrices et dénaturantes ; validez en utilisant des lysats de contrôle positif de tissus humains ou murins connus pour exprimer ANO1, tels que le muscle lisse gastro-intestinal ou l'épithélium des voies respiratoires.
• L'immunogène (aa 40–210) correspond à la région N-terminale ; la détection de certains isoformes d'épissage peut varier, vérifiez donc la reconnaissance spécifique de l'isoforme si nécessaire.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, titre l'anticorps pour déterminer les concentrations de travail optimales et confirmez la spécificité contre la protéine ANO1 recombinante ou des lysats cellulaires de surexpression.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité de lot à lot est possible ; incluez des contrôles appropriés et envisagez une cross-absorption si des bandes non spécifiques sont observées.
• La réactivité croisée est vérifiée pour l'humain et la souris ; pour d'autres espèces, effectuez un alignement de séquence de la région immunogène et des tests pilotes.

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