Anticorps polyclonal de lapin anti-DNMT3L pour WB, IHC-P, ELISA - Q9UJW3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DNMT3L

• DNMT3L est un facteur régulateur catalytiquement inactif des ADN méthyltransférases, qui peut soit promouvoir soit inhiber la méthylation de l'ADN selon le contexte.
• Essentiel pour la fonction de DNMT3A et DNMT3B : il active DNMT3A et DNMT3B en se liant à leur domaine catalytique (PubMed:17687327). Références associées : PMID:17687327
• Il accélère la liaison de l'ADN et de la S-adénosyl-L-méthionine (AdoMet) aux méthyltransférases, puis se dissocie du complexe après la liaison de l'ADN (PubMed:17687327). Références associées : PMID:17687327
• DNMT3L reconnaît l'histone H3 lysine 4 non méthylée (H3K4me0) et induit la méthylation de novo de l'ADN par recrutement ou activation de DNMT3 (PubMed:17687327). Références associées : PMID:17687327
• Dans les cellules germinales, DNMT3L est nécessaire à la méthylation des locus imprintés conjointement avec DNMT3A ; dans les cellules germinales mâles, elle méthyle spécifiquement les rétrotransposons pour empêcher leur mobilisation.
• Dans les cellules souches embryonnaires, DNMT3L promeut la méthylation de l'ADN des gènes domestiques et inhibe la méthylation au niveau des promoteurs de gènes bivalents en interagissant avec la composante EZH2 du complexe PRC2/EED-EZH2, empêchant le recrutement de DNMT3A/B.
• DNMT3L favorise la différenciation des CSE en cellules germinales primordiales en inhibant la méthylation de l'ADN au niveau du promoteur RHOX5, activant ainsi son expression.
• Au niveau sous-cellulaire, DNMT3L se localise majoritairement dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle dans la modification de la chromatine.
• Elle est exprimée à faible niveau dans plusieurs tissus, notamment les testicules, les ovaires et le thymus, et appartient à la famille des protéines à doigt de zinc, caractérisées par des motifs de liaison aux métaux.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Envisagez une fractionation nucléaire pour enrichir DNMT3L pour la détection par Western blot, car elle se localise dans le noyau.
• Pour IHC-P, un démasquage antigénique peut être nécessaire ; validez l'essai dans des tissus dont l'expression faible est connue, comme les testicules ou les ovaires.
• La séquence de l'immunogène est conservée chez l'homme, la souris et le rat ; la réactivité croisée est prédite mais doit être confirmée expérimentalement.
• L'anticorps détecte une bande d'environ 44 kDa ; une échelle de protéines pré-colorée est recommandée pour une estimation précise de la taille.
• Le blocage par le peptide immunogène peut servir de contrôle de spécificité pour les essais WB et IHC-P.

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