Anticorps monoclonal de lapin anti-DNMT3B pour WB, ChIP, ELISA - Q9UBC3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la DNMT3B

• La DNMT3B est une ADN (cytosine-5)-méthyltransferase qui catalyse la méthylation de novo de l'ADN, établissant les profils de méthylation essentiels au développement embryonnaire et à la différenciation cellulaire.
• Elle méthyle préférentiellement l'ADN nucléosomal dans la région centrale et peut coordonner la méthylation de l'ADN avec les modifications des histones pour réguler la structure de la chromatine et l'expression des gènes.
• Il existe de multiples isoformes issues d'épissages alternatifs ; les isoformes 1, 3 et probablement 2 sont fonctionnelles, tandis que les isoformes 4 et 5 manquent des motifs méthyltransferases conservés et sont probablement catalytiquement inactives.
• Au-delà de son rôle catalytique, la DNMT3B agit comme un corépresseur transcriptionnel en interagissant avec CBX4 et ZHX1, médiant la répression génique indépendamment de son activité de méthylation.
• En association avec la DNMT1 et le facteur CTCFL/BORIS, la DNMT3B module la diméthylation des histones H3K4 et H3K9 au niveau du promoteur de BAG1, contribuant à l'activation transcriptionnelle.
• La DNMT3B est nécessaire à la répression du gène DUX4 dans les cellules somatiques ; sa dérégulation est liée à la dystrophie musculaire facio-scapulo-humérale de type 4 (FSHD4). Références associées : PMID:27153398
• Localisée dans le noyau, la DNMT3B est largement exprimée, avec des niveaux élevés dans le foie fœtal, le cœur, les reins et le placenta, et des niveaux plus faibles dans les tissus adultes tels que le cerveau et le muscle squelettique. L'isoforme 1 est absente dans le cerveau, le muscle squelettique et les PBMC.
• Les modifications post-traductionnelles, y compris la phosphorylation et la citrullination, peuvent influencer la stabilité et l'activité de la DNMT3B ; elle est également la cible de conjugaison de type ubiquitine.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 206–360 de la DNMT3B humaine, une région contenant une partie du domaine PWWP ; vérifiez l'expression des isoformes fonctionnelles dans votre système d'échantillonnage pour garantir la détection.
• Pour le Western blot (WB), attendez-vous à une bande proche de 96 kDa ; validez la spécificité avec des contrôles de knockout ou de knockdown de la DNMT3B, car certaines isoformes peuvent migrer à des tailles différentes.
• Pour le ChIP, optimisez soigneusement la réticulation, le cisaillement et la concentration en anticorps, car la DNMT3B est une protéine nucléaire associée à la chromatine ; incluez des régions négatives appropriées.
• En ELISA, générez une courbe standard avec l'immunogène recombinant pour évaluer la linéarité ; l'anticorps peut également être utilisé pour la capture ou la détection dans un ELISA sandwich avec des paires appariées.
• Comme la DNMT3B est exprimée à de faibles niveaux dans de nombreux tissus, envisagez un enrichissement nucléaire ou une charge protéique élevée pour une détection sensible.
• Aucune réactivité croisée avec des espèces non humaines n'est rapportée ; validez dans le système pertinent si vous l'utilisez au-delà des échantillons humains.

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