Anticorps polyclonal anti-DNMT3B pour WB, IHC-P, ELISA - Q9UBC3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de DNMT3B

• DNMT3B (ADN (cytosine-5)-méthyltransférase 3B) est une enzyme clé requise pour la méthylation de novo de l’ADN à l’échelle du génome, essentielle à l’établissement des profils de méthylation au cours du développement précoce.
• Elle méthyle préférentiellement l’ADN nucléosomal au sein de la région centrale et peut fonctionner comme un corépresseur transcriptionnel en interagissant avec CBX4 et ZHX1, indépendamment de son activité méthyltransférase.
• Dans un complexe avec DNMT1 et le facteur de transcription CTCFL/BORIS, DNMT3B active l’expression du gène BAG1 en modulant la diméthylation de l’histone H3 en K4 et K9.
• Requise pour la répression de DUX4 dans les cellules somatiques (PubMed:27153398). Références associées : PMID:27153398
• L’épissage alternatif génère plusieurs isoformes ; les isoformes 4 et 5 ne possèdent pas les motifs méthyltransférases essentiels et sont probablement non fonctionnelles.
• DNMT3B est exclusivement nucléaire et exprimée de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans le foie fœtal, le cœur, les reins et le placenta. L’isoforme 1 est absente du cerveau, des muscles squelettiques et des PBMC, tandis que l’isoforme 5 est spécifique des testicules.
• La protéine contient des domaines à doigts de zinc, subit une phosphorylation et une citrullination, et joue un rôle dans la répression génique et certaines maladies (par exemple, le syndrome ICF).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’anticorps a été produit contre une protéine recombinante correspondant à la région N-terminale (aa 1 à 100) de la DNMT3B humaine. Cette région est présente dans la plupart des isoformes ; toutefois, il convient de confirmer la détection de toutes les variantes attendues dans votre échantillon.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d’environ 96 kDa. Utilisez des extraits nucléaires ou des lysats cellulaires totaux provenant de tissus présentant une forte expression de DNMT3B (par exemple, le foie fœtal ou le placenta) pour une détection optimale.
• Il a été rapporté que cet anticorps réagit également avec les protéines de souris et de rat ; validez ses performances dans l’espèce et l’application pertinentes.
• Pour l’immunohistochimie (IHC-P), envisagez des essais sur des coupes de tissus fœtaux, où DNMT3B est abondante. Les conditions de récupération antigénique peuvent nécessiter une optimisation.
• Les applications ELISA doivent inclure des contrôles négatifs et positifs appropriés afin de garantir la spécificité.

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