Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-DNMT3A pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6K1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DNMT3A

• DNMT3A est une ADN (cytosine-5)-méthyltransferase essentielle pour la méthylation de novo de l'ADN, établissant les profils de méthylation au cours du développement et coordonnant avec les modifications des histones (PubMed:12138111, PubMed:16357870, PubMed:30478443).
  Références associées : PMID:12138111, PMID:16357870, PMID:30478443
• Elle modifie l'ADN de manière non processive et méthyle les sites non-CpG, avec une préférence pour les régions de liaison de l'ADN entre les nucléosomes, et son activité est inhibée par l'histone H1 (Par similarité).
• DNMT3A joue un rôle critique dans l'empreinte parentale paternelle et maternelle et est nécessaire pour la méthylation de la plupart des loci soumis à empreinte dans les cellules germinales (Par similarité).
• Elle agit comme un corépresseur transcriptionnel pour ZBTB18, est recrutée sur la 'Lys-36' triméthylée de l'histone H3 (H3K36me3) et peut réprimer la transcription par le recrutement de l'activité HDAC (Par similarité).
• La protéine se localise principalement dans le noyau et sur les chromosomes, mais est également détectable dans le cytoplasme (UniProt Q9Y6K1).
• Hautement exprimée dans les tissus fœtaux, le muscle squelettique, le cœur, les cellules mononucléées du sang périphérique et le rein, avec des niveaux plus faibles dans le placenta, le cerveau, le foie, le côlon, la rate, l'intestin grêle et le poumon (UniProt Q9Y6K1).
• L'utilisation de promoteurs alternatifs et l'épissage produisent des isoformes telles que DNMT3A2 (TBRS, HESJAS), ajoutant une diversité fonctionnelle (UniProt Q9Y6K1).

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser un protocole d'extraction nucléaire pour enrichir le signal de DNMT3A, en attendant une bande autour de 102 kDa. Validez la spécificité de l'anticorps avec des échantillons de knockout DNMT3A ou traités par siRNA.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), anticipez une coloration principalement nucléaire, avec un signal cytoplasmique possible dans certains types cellulaires ; utilisez des méthodes de fixation et de perméabilisation appropriées.
• Dans les applications ELISA, titrez l'anticorps contre la protéine DNMT3A recombinante ou l'antigène peptidique pour optimiser les concentrations de travail.
• Lors de l'évaluation de la réactivité croisée entre l'humain, la souris et le rat, confirmez l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène pour assurer une détection précise.

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