Anticorps polyclonal de lapin anti-DNMT1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P26358

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DNMT1

• DNMT1, également connue sous le nom d'ADN méthyltransférase HsaI, MCMT ou CXXC9, est une protéine nucléaire d'environ 183 kDa qui sert de principale ADN méthyltransférase de maintenance chez l'homme.
• Elle méthyle préférentiellement les dinucléotides CpG hémiméthylés et s'associe aux foyers de réplication de l'ADN pendant la phase S pour copier fidèlement les motifs de méthylation sur le brin nouvellement synthétisé, assurant ainsi l'héritage épigénétique. Références associées : PMID:17200670, PMID:21745816, PMID:26070743
• Pendant les phases G2 et M, DNMT1 reste associée à la chromatine pour maintenir la méthylation indépendamment de la réplication, préservant ainsi les marques de méthylation génomique tout au long du cycle cellulaire. Références associées : PMID:21745816
• DNMT1 médie également la répression transcriptionnelle en se liant directement à HDAC2 et peut coordonner la méthylation de l'ADN avec les modifications des histones, telles que la diméthylation de H3K9, en concert avec DNMT3B et CTCFL. Références associées : PMID:10888872, PMID:18413740
• Elle forme un complexe corépresseur qui facilite l'hyperméthylation induite par KRAS et la répression des gènes suppresseurs de tumeurs dans le cancer colorectal, et maintient de manière similaire la répression des gènes du développement dans les cellules souches embryonnaires. Références associées : PMID:24623306
• Exprimée de manière ubiquitaire avec les niveaux les plus élevés dans les tissus fœtaux, le cœur, les reins et le placenta ; l'isoforme 2 est moins abondante. Localisée dans le noyau et les chromosomes, et contient des domaines caractéristiques de doigt de zinc CXXC (Mots-clés : épissage alternatif, doigt de zinc).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été produit contre un fragment N-terminal (aa 1-124) de DNMT1 ; il est donc censé reconnaître la DNMT1 pleine longueur et éventuellement les produits de troncation N-terminale.
• Lors de la réalisation d'un western blot, utilisez un gel SDS-PAGE à 6-8 % et assurez un transfert efficace en raison de la grande taille de DNMT1 (~183 kDa).
• Pour l'immunohistochimie et l'immunofluorescence, une perméabilisation nucléaire peut être nécessaire ; envisagez de valider la spécificité de la coloration avec des contrôles de knockdown ou knockout de DNMT1.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec la DNMT1 de souris et de rat, mais les utilisateurs doivent vérifier ses performances pour chaque espèce et type de tissu étant donné l'expression ubiquitaire mais variable.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il peut présenter une variabilité d'un lot à l'autre ; incluez un contrôle de charge et des étalons de référence internes pour les dosages quantitatifs.

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