Anticorps Monoclonaux de Lapin Anti-DNMT1 pour WB, IHC-P, IP, ELISA - P26358

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de DNMT1

• Identité de la Protéine et Isoformes : DNMT1 (ADN (cytosine-5)-méthyltransférase 1) est une protéine à doigt de zinc de type CXXC avec les alias MCMT, CXXC9, et ADN méthyltransférase HsaI. Il existe plusieurs isoformes ; l'isoforme 2 est moins exprimée que l'isoforme canonique 1.
• Maintenance de la Méthylation de l'ADN : Fonctionne comme la principale ADN méthyltransférase de maintenance, méthylant préférentiellement les sites CpG hémiméthylés pour préserver les motifs de méthylation lors de la réplication de l'ADN. S'associe aux foyers de réplication en phase S. Références associées : PMID:17200670, PMID:21745816, PMID:26070743
• Association à la Chromatine durant le Cycle Cellulaire : En plus de son association en phase S, DNMT1 se lie à la chromatine durant les phases G2 et M, contribuant à la maintenance de la méthylation de l'ADN indépendante de la réplication. Références associées : PMID:21745816
• Répression Transcriptionnelle : Médie la répression transcriptionnelle par interaction directe avec HDAC2, et coordonne la méthylation de l'ADN avec les modifications des histones pour réguler l'expression des gènes. Références associées : PMID:10888872, PMID:16357870
• Double Rôle dans le Silenciage et l'Activation des Gènes : Forme des complexes corépresseurs qui favorisent l'hyperméthylation médiée par KRAS et le silenciage des gènes suppresseurs de tumeurs dans les cellules cancéreuses colorectales ; maintient également les états chromatiniens répressifs dans les cellules souches embryonnaires. Inversement, il peut participer à l'activation des gènes (par exemple, BAG1) par modulation de la diméthylation de l'histone H3K4 et H3K9 en complexe avec DNMT3B et CTCFL/BORIS. Références associées : PMID:24623306, PMID:18413740
• Localisation Subcellulaire et Expression Tissulaire : Principalement nucléaire, associé aux chromosomes. Expression ubiquitaire ; très abondant dans les tissus fœtaux, le cœur, le rein, le placenta et les cellules mononucléaires du sang périphérique, avec des niveaux plus faibles dans la rate, le poumon, le cerveau, l'intestin grêle, le côlon, le foie et le muscle squelettique.
• Modifications Post-traductionnelles et Associations Maladives : Soumis à acétylation, phosphorylation et ubiquitination. Les mutations de DNMT1 sont liées à la neuropathie sensorielle héréditaire et à l'ataxie cérébelleuse autosomique dominante, la surdité et la narcolepsie (ADCADN).

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1–100 à l'extrémité N-terminale du DNMT1 humain ; envisagez d'utiliser un test de blocage par peptide pour confirmer la spécificité si nécessaire.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 183 kDa. Utilisez un gel d'acrylamide à faible pourcentage (par exemple, 6–8 %) et optimisez les conditions de transfert pour les protéines de poids moléculaire élevé.
• En IHC-P, effectuez une récupération d'antigène appropriée et validez la coloration en utilisant des contrôles de tissus positifs et négatifs (par exemple, cœur, placenta ou côlon).
• Il est signalé que l'anticorps présente une réactivité croisée avec les échantillons humains, de souris et de rat. Lors de l'extension à d'autres espèces, vérifiez la réactivité expérimentalement.
• Pour l'immunoprécipitation et l'ELISA, suivez les protocoles standard et incluez des contrôles appropriés pour tenir compte d'une liaison non spécifique potentielle.

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