Anticorps polyclonal de lapin anti-DNA topoisomérase I (TOP1) pour WB, IHC-P, IP, ELISA - P11387

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la DNA topoisomérase I

• La DNA topoisomérase I (TOP1) est une enzyme codée par le gène TOP1, avec un poids moléculaire d'environ 91 kDa (UniProt : P11387). Elle est également connue sous le nom de DNA topoisomérase I.
• TOP1 soulage la superhélicité de l'ADN et la tension de torsion lors de la réplication et de la transcription en clivant transitoirement un brin d'ADN, formant un intermédiaire covalent, faisant pivoter le brin libre, puis religuant la cassure.
• Elle régule l'épissage alternatif de l'ARNm précurseur du facteur tissulaire (F3) dans les cellules endothéliales, soulignant un rôle dans l'expression des gènes liés à la coagulation.
• TOP1 contribue à la régulation du rythme circadien en modifiant la structure de la chromatine aux éléments de réponse ROR sur le promoteur de BMAL1, influençant la transcription des gènes centraux de l'horloge.
• La protéine se localise dans le noyau, avec une présence à la fois dans le nucléole et le nucléoplasme.
• TOP1 est exprimée dans les cellules endothéliales, parmi d'autres tissus.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation, et elle a été impliquée comme proto-oncogène dans des remaniements chromosomiques.
• C'est une phosphoprotéine soumise à l'ubiquitination et à la formation de liaisons iso-peptidiques, reflétant un contrôle réglementaire complexe.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique de la région N-terminale (aa 1-100), donc l'anticorps reconnaît probablement la protéine pleine longueur. Pour le Western blot, attendez-vous à une bande près de 91 kDa ; envisagez d'utiliser des contrôles de chargement appropriés et d'optimiser les conditions de blocage.
• Pour l'IHC-P, des méthodes de récupération de l'antigène peuvent être nécessaires pour exposer l'épitope ; validez la coloration sur des tissus connus positifs tels que ceux riches en cellules endothéliales.
• Dans l'immunoprécipitation, vérifiez l'efficacité de capture dans des lysats cellulaires pertinents exprimant TOP1, et utilisez des contrôles négatifs appropriés (par exemple, IgG).
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; associez-le à un anticorps apparié si nécessaire et validez la sensibilité avec des standards de protéines recombinantes.

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