Anticorps polyclonal de lapin anti-ADN-PKcs pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P78527

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ADN-PKcs (sous-unité catalytique de la protéine kinase dépendante de l'ADN)

• ADN-PKcs est la sous-unité catalytique du complexe de la protéine kinase dépendante de l'ADN (ADN-PK), codée par le gène PRKDC (également appelé HYRC, HYRC1, DNPK1, p460).
• En tant que capteur moléculaire des dommages à l'ADN, ADN-PKcs est essentiel pour la jonction des extrémités non homologues (NHEJ), la voie principale de réparation des cassures double-brin (DSB) et de la recombinaison V(D)J. Références associées : PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• ADN-PKcs nécessite la liaison à l'ADN pour son activation catalytique ; il est recruté aux extrémités de l'ADN par l'hétérodimère Ku70/Ku80 (XRCC6/XRCC5) pour protéger et aligner les extrémités d'ADN cassé et isoler la cassure pour la NHEJ. Références associées : PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• Au-delà de la réparation de l'ADN, ADN-PKcs agit comme protéine d'échafaudage, modulant la transcription, favorisant l'assemblage des ribosomes par traitement de l'ARNr précurseur et maintenant la stabilité télomérique. Références associées : PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805, PMID:32103174
• ADN-PKcs est principalement localisé dans le noyau et le nucléole, et est également présent dans le cytosol.
• En tant que sérine/thréonine kinase reconnaissant le consensus [ST]-Q, ADN-PKcs phosphoryle des substrats clés dont H2AX (Ser-139) pour la signalisation des dommages à l'ADN, AKT (Ser-473) pour la régulation de la voie PI3K/AKT, et de nombreux facteurs de réparation de l'ADN (par ex. XRCC4, XRCC5, XRCC6). Références associées : PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805, PMID:14627815, PMID:16046194, PMID:15262962

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 3987-4086 de l'ADN-PKcs humain ; une réactivité est attendue près de la région C-terminale de la protéine.
• Pour le Western blot (WB), la masse moléculaire prédite est d'environ 469 kDa ; il est recommandé d'utiliser des gels gradients SDS-PAGE à faible pourcentage et des temps de transfert prolongés pour garantir un transfert efficace de cette grande protéine.
• En immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF/ICC), la validation des méthodes de démasquage antigénique et des conditions de fixation sur les échantillons de tissus ou cellulaires concernés est recommandée.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être confirmée par le fournisseur ; incluez systématiquement des contrôles positifs et négatifs appropriés dans votre dispositif expérimental.

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