Anticorps monoclonal de lapin anti-DLDH/DLD pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09622

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de DLDH/DLD

• La DLDH/DLD (dihydrolipoamide déshydrogénase) est une oxydoréductase flavoprotéique qui utilise la FAD et le NAD comme cofacteurs et existe sous forme d’homodimère. Elle est codée par le gène DLD, dont l’épissage alternatif produit plusieurs isoformes.
• En tant que composant E3 des complexes de la pyruvate déshydrogénase, de l’α-cétoglutarate déshydrogénase et de la déshydrogénase des α-cétoacides à chaîne ramifiée, la DLDH catalyse la réoxydation de la dihydrolipoamide avec le NAD+ comme accepteur d’électrons, une étape essentielle du métabolisme énergétique mitochondrial. Références associées : PMID:16442803, PMID:16770810, PMID:20160912
• Elle est également un composant du système de clivage de la glycine (GCS), participant à la dégradation de la glycine et au métabolisme à un carbone, sous la désignation GCSL. Références associées : PMID:15712224
• Dans le noyau, la DLDH s’associe à la succinyltransférase des histones KAT2A, fournissant du succinyl-CoA pour la succinylation des lysines des histones et établissant un lien entre le métabolisme et la régulation épigénétique. Références associées : PMID:29211711
• La DLDH monomérique peut agir comme une sérine protéase aux fonctions multiples, comme le suggère une activité de clivage indépendante de son rôle de déshydrogénase. Références associées : PMID:17404228
• Le fractionnement subcellulaire et l’immunolocalisation révèlent la présence de DLDH dans la matrice mitochondriale, le noyau, ainsi que dans les prolongements cellulaires (cils, flagelles) et les vésicules cytoplasmiques (acrosome), ce qui étaye son rôle dans la capacitation des spermatozoïdes et la réaction acrosomique (par similarité).
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation, la phosphorylation et la formation de ponts disulfure, qui peuvent réguler son activité et sa localisation ; les mutations du gène DLD entraînent un déficit en dihydrolipoamide déshydrogénase (déficit en E3).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 401–500 de la DLDH/DLD humaine, une région probablement conservée chez les mammifères, ce qui est cohérent avec la réactivité croisée observée chez la souris et le rat.
• Pour le western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d’environ 54 kDa (précurseur) ; l’utilisation de conditions réductrices contribue à rompre les ponts disulfure. Inclure des contrôles appropriés de fractionnement cellulaire lors de l’évaluation de la localisation mitochondriale par rapport à la localisation nucléaire.
• En immunohistochimie (IHC-P) et en immunocytochemie (IF/ICC), valider l’anticorps sur des tissus ou des types cellulaires connus pour exprimer la DLDH et envisager des méthodes de récupération antigénique, car la coloration peut varier.
• Pour les applications ELISA, confirmer la liaison à la protéine DLDH recombinante ou native dans les conditions de votre test.

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