Anticorps monoclonal de lapin anti-DKK3 pour WB/IF/ICC/ELISA - Q9UBP4

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DKK3

• DKK3 (protéine 3 apparentée à Dickkopf), également connue sous le nom de REIC ou RIG, est une glycoprotéine sécrétée appartenant à la famille Dickkopf des antagonistes de Wnt. Elle contient un peptide signal, deux domaines riches en cystéine et des régions en hélice superenroulée (coiled-coil).
• DKK3 antagonise la signalisation Wnt/β-caténine canonique en se liant aux co-récepteurs LRP5/6 et en favorisant leur internalisation via les protéines transmembranaires KREMEN, inhibant ainsi l'interaction ligand-récepteur de Wnt.
• Cette protéine joue un rôle crucial dans le développement embryonnaire, y compris la mise en place de l'axe antéropostérieur, la morphogenèse des membres, la somitogenèse et la formation de l'œil, en modulant localement l'activité Wnt.
• Dans les tissus adultes, DKK3 est impliquée dans l'homéostasie osseuse, la suppression tumorale (souvent sous-exprimée dans les cancers) et les processus neurodégénératifs tels que la maladie d'Alzheimer, bien que ces dernières fonctions soient déduites par similitude.
• La localisation subcellulaire est exclusivement extracellulaire : DKK3 est sécrétée dans l'espace extracellulaire et ne semble pas être liée à la membrane ou intracellulaire.
• L'expression est la plus élevée dans le cœur, le cerveau et la moelle épinière, avec des niveaux plus faibles dans d'autres tissus, suggérant des fonctions de régulation spécifiques aux tissus.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la N-glycosylation et la formation de ponts disulfure, typiques des protéines sécrétées à nœud de cystéine, et peuvent affecter sa stabilité et son activité.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 200–350 du DKK3 humain, couvrant la région C-terminale riche en motifs en hélice superenroulée. Cette région peut détecter la forme complète de DKK3 et potentiellement certains produits de clivage ; vérifiez le poids moléculaire dans votre système.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 38 kDa (calculé à partir de la séquence d'acides aminés). La glycosylation peut entraîner une migration légèrement plus élevée de la bande observée. Utilisez des contrôles appropriés.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), comme DKK3 est une protéine sécrétée, l'inclusion d'un agent bloquant l'appareil de Golgi (par exemple, BFA) peut améliorer la coloration intracellulaire si une rétention est souhaitée ; sinon, envisagez d'analyser le DKK3 sécrété dans les surnageants cellulaires par ELISA.
• L'anticorps est testé pour les applications ELISA ; il peut être utilisé pour la capture ou la détection d'antigène selon le format du test. Effectuez des tests de réactivité croisée avec votre matrice particulière.
• Malgré la réactivité croisée signalée avec la souris et le rat, l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène est élevée ; validez tout de même la réactivité dans les tissus spécifiques à l'espèce.
• Titrez toujours l'anticorps dans vos conditions de test pour obtenir un rapport signal/bruit optimal.

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