Anticorps polyclonal anti-DKC1 pour IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60832

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de DKC1

• DKC1 code la dyskérine, la sous-unité catalytique du complexe ribonucléoprotéique nucléolaire H/ACA (snoRNP), responsable de la pseudouridylation de l’ARNr. Elle isomérise l’uridine de sorte que le ribose se lie au C5 plutôt qu’au N1, introduisant des résidus de pseudouridine qui stabilisent la conformation de l’ARNr. Références associées : PMID:25219674 PMID:32554502
• Elle est essentielle à la biogenèse des ribosomes et, par le biais du traitement correct et du transport intranucléaire de TERC (le composant ARN de la télomérase), elle est nécessaire au maintien des télomères. Références associées : PMID:19179534
• Elle favorise également l’adhésion cellule-cellule et cellule-substrat, augmente le taux de prolifération cellulaire et induit une surexpression de la cytokératine.
• Elle se localise principalement dans le nucléole et les corps de Cajal au sein du noyau, avec une certaine présence dans le cytoplasme.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, ce qui reflète son rôle domestique dans la modification de l’ARNr.
• Elle est soumise à diverses modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation, la phosphorylation et la conjugaison de type ubiquitine, qui peuvent réguler son activité ou sa stabilité.
• Les variants génétiques de DKC1 sont associés à la dyskératose congénitale liée à l’X, caractérisée par une insuffisance médullaire, une prédisposition au cancer et des signes tels que la dystrophie unguéale et la leucoplasie orale ; les mutations peuvent également provoquer le syndrome de Hoyeraal-Hreidarsson.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 245–514 de DKC1 humain (NP_001354.1), couvrant la région centrale jusqu’à la région C-terminale. Tenez compte de cette séquence lors de la conception de réactifs de détection complémentaires ou de la cartographie des épitopes.
• Pour l’IHC-P, étant donné que DKC1 est exprimée de manière ubiquitaire mais enrichie dans les nucléoles, optimisez la récupération antigénique et validez la coloration sur des tissus témoins positifs tels que le testicule ou des lignées cellulaires proliférantes. Incluez des contrôles négatifs (par exemple, des échantillons appauvris en DKC1) afin de confirmer la spécificité.
• Les applications en IF/ICC devraient révéler la localisation nucléolaire et celle dans les corps de Cajal. Utilisez des méthodes appropriées de fixation et de perméabilisation, et effectuez une double coloration avec un marqueur nucléolaire (par exemple, la fibrillarine) afin de vérifier le profil attendu.
• L’ELISA peut nécessiter une optimisation rigoureuse des conditions de revêtement et de détection en raison de la taille relativement importante de la protéine. La réactivité croisée avec les orthologues de la souris et du rat doit être vérifiée expérimentalement si des échantillons provenant de ces espèces sont utilisés.

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