Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-DiMethyl-DNMT3A-K44 (O88508) pour IF/ICC et ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la DNA (cytosine-5)-méthyltransférase 3A (DNMT3A)

• La DNMT3A est une enzyme clé nécessaire à la méthylation de novo de l'ADN à l'échelle du génome, essentielle pour l'établissement des profils de méthylation au cours du développement. Elle modifie l'ADN de manière non processive et peut méthyler à la fois les sites CpG et non-CpG.
• L'enzyme fonctionne en coordination avec les modifications des histones, méthylant préférentiellement l'ADN liant entre les nucléosomes et est inhibée par l'histone H1. Elle joue également un rôle dans l'empreinte parentale paternelle et maternelle, avec la méthylation de la plupart des loci soumis à empreinte dans les cellules germinales.
• La DNMT3A agit comme un corépresseur transcriptionnel, par exemple en interagissant avec ZBTB18, et peut réprimer la transcription via le recrutement de l'activité HDAC. Elle est recrutée vers les régions génomiques marquées par l'histone H3 triméthylée sur la Lys36 (H3K36me3).
• Au niveau subcellulaire, la DNMT3A se localise principalement dans le noyau et s'associe aux chromosomes, s'accumulant au niveau des répétitions majeures des satellites péricentriques de l'hétérochromatine. Elle peut également se trouver dans le cytoplasme.
• Deux isoformes existent : l'isoforme 1 est exprimée de manière ubiquitaire à de faibles niveaux, tandis que l'expression de l'isoforme 2 est restreinte aux tissus subissant une méthylation de novo active, tels que la rate, les testicules et le thymus.
• La protéine subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation (par ex. sur Ser102, Ser239, Ser251, Ser386, Ser389, Thr120, Thr257), la méthylation (par ex. l'arginine oméga-N-méthylée sur Arg167) et l'auto-méthylation sur Cys706.

Références connexes : PMID:10555141, PMID:11399089, PMID:11919202, PMID:16567415, PMID:17713477, PMID:9662389, PMID:11350943, PMID:18823905, PMID:15215868, PMID:20547484, PMID:21481189, PMID:12138111, PMID:15456878, PMID:21183079, PMID:24129315

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique diméthylé sur la Lys44 de la DNMT3A de souris. Pour l'IF/ICC, considérez que cette modification peut être spécifique au contexte ; validez dans votre système en comparant les signaux entre un blocage par peptide méthylé et non méthylé ou en utilisant des contrôles knockout/knockdown.
• Les applications ELISA peuvent bénéficier de l'utilisation du peptide immunisant comme contrôle positif et d'un peptide non modifié comme contrôle négatif pour confirmer la spécificité à la diméthylation.
• Étant donné la réactivité croisée avec l'humain et le rat, cet anticorps peut être adapté pour étudier les sites de méthylation conservés entre espèces, mais confirmez la réactivité spécifique à l'espèce dans vos tests.
• Les dilutions de travail optimales doivent être déterminées empiriquement ; les plages typiques pour l'IF/ICC et l'ELISA dépendent de l'application et doivent être optimisées par l'utilisateur final.

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