Anticorps monoclonal de lapin anti-DHX9/hélicase A de l'ARN pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q08211

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de DHX9

• DHX9, également connue sous le nom d'hélicase A de l'ARN, est une hélicase multifonctionnelle des acides nucléiques dépendante de l'ATP, qui déroule l'ADN et l'ARN dans la direction 3' vers 5', participant ainsi à la réplication de l'ADN, à la transcription, au traitement de l'ARN, à la traduction et à l'extinction des gènes. Références associées : PMID:11416126, PMID:12711669, PMID:15355351

• DHX9 déroule divers substrats d'acides nucléiques, notamment l'ADN double brin, l'ARN double brin, les hybrides ADN:ARN, les boucles D, les boucles R, les quadruplexes G et l'ADN triple brin, et nécessite une extrémité simple brin 3' pour l'initiation. Références associées : PMID:20669935, PMID:21561811, PMID:24049074

• En tant que membre de la famille des hélicases à boîte DEAH, DHX9 agit comme coactivateur transcriptionnel, établissant un pont entre l'ARN polymérase II et des facteurs de transcription tels que BRCA1, CREBBP, RELA et SMN1, et se lie au promoteur de CDKN2A. Références associées : PMID:11038348, PMID:11149922, PMID:11416126

• Dans la régulation post-transcriptionnelle, DHX9 favorise l'épissage alternatif, stabilise l'ARNm de MYC via le complexe CRD et améliore la traduction de certains ARNm en se liant à la région 5' UTR. Références associées : PMID:11402034, PMID:16680162, PMID:28221134, PMID:19029303, PMID:22190748

• DHX9 se localise principalement dans le noyau (nucléoplasme, nucléole), mais effectue également des navettes vers le cytoplasme et s'associe au cytosquelette et au centrosome dans certaines conditions.

• Les modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, modulent l'activité et les interactions de DHX9.

• Lors d'infections virales, DHX9 agit comme un capteur cytosolique des acides nucléiques viraux et améliore la transcription, l'épissage et la traduction du VIH-1 en se liant à l'ARN TAR et à d'autres éléments viraux. Références associées : PMID:20696886, PMID:21957149, PMID:11096080, PMID:9892698, PMID:25149208

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant à la région C-terminale (aa 1100–1200) de la DHX9 humaine ; vérifiez que l'anticorps reconnaît la DHX9 endogène au poids moléculaire attendu d'environ 141 kDa dans votre système d'échantillonnage.
• Pour le Western blot, en raison du poids moléculaire élevé de DHX9, utilisez un gel d'acrylamide à faible pourcentage (par exemple 6–8 %) et assurez-vous que les conditions de transfert sont adéquates ; incluez des contrôles de charge appropriés.
• Il est rapporté que cet anticorps réagit avec la DHX9 humaine, murine et de rat ; cependant, les niveaux d'expression varient selon les tissus et les lignées cellulaires. Optimisez donc la préparation des échantillons et la dilution de l'anticorps pour chaque application.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), une récupération antigénique induite par la chaleur dans un tampon citrate (pH 6,0) est recommandée, ainsi que l'utilisation d'un système de détection sensible ; validez la spécificité de la coloration à l'aide de contrôles appropriés.
• L'anticorps convient à l'immunoprécipitation (IP) et à l'ELISA ; envisagez d'utiliser le peptide immunogène comme contrôle positif et validez les performances de l'anticorps dans votre protocole expérimental spécifique.

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