Anticorps polyclonal Anti-DHX9/RNA Helicase A pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q08211

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DHX9/RNA Helicase A

• DHX9, également connu sous le nom d'ARN hélicase A, protéine 9 à boîte DEAH, leucophysine (LKP) et ADN hélicase nucléaire II (NDH II), est une ARN hélicase multifonctionnelle à boîte DEAH.
• Possède une activité hélicase ATP-dépendante 3'→5' qui dénoue une large gamme de substrats, notamment l'ADNdb, l'ARNdb, les hybrides ADN:ARN, les fourches, les boucles D, les boucles R, l'ADN triplexe et les G-quadruplexes ; nécessite une queue simple brin 3' pour pénétrer. Se lie à l'ADNsb, l'ARNsb, l'ARN poly(A) et les substrats circulaires ; stimule la relaxation des superenroulements médiée par TOP2A. Références associées : PMID:1537828 PMID:20669935 PMID:21561811 PMID:24049074 PMID:12711669
• Agit comme coactivateur transcriptionnel reliant l'ARN polymérase II aux facteurs de transcription (BRCA1, CREBBP, RELA, SMN1) et se lie au promoteur CDKN2A. Références associées : PMID:11038348 PMID:11149922 PMID:11416126
• Joue des rôles divers dans la régulation post-transcriptionnelle des gènes : coopère avec NUP98 dans l'épissage alternatif, résout les structures d'ARNdb inversées répétées Alu nocives et facilite l'export nucléaire des ARNm non épissés contenant un CTE. Références associées : PMID:11402034 PMID:16680162 PMID:28221134 PMID:28355180 PMID:10924507 PMID:9162007
• Impliqué dans la traduction de l'ARNm : améliore la traduction via l'élément PCE dans la région 5'-UTR, stabilise l'ARNm MYC via le complexe médié par le CRD et stimule la traduction dépendante du collagène et de LIN28A avec LARP6 et LIN28A. Références associées : PMID:16680162 PMID:19029303 PMID:22190748 PMID:21247876
• Fonctionne comme facteur de chargement d'ARNsi pour l'assemblage du RISC et le silençage génique médié par l'ARN. Références associées : PMID:17531811
• Dans l'immunité innée, il se lie à l'ARNdb court dérivé du rotavirus et déclenche l'activation de l'inflammasome NLRP9, conduisant à la libération d'IL-18 et à la pyroptose. Références associées : PMID:28636595
• Il est majoritairement nucléaire (nucléoplasme, nucléole) mais se localise également dans le cytoplasme, le centrosome et le cytosquelette ; il fait l'objet de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 329–563 de DHX9, une région conservée chez l'homme, la souris et le rat ; cette séquence se situe dans le domaine cœur de l'hélicase et permet de détecter plusieurs isoformes.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prévu est d'environ 141 kDa. Assurez-vous d'un transfert protéique adéquat et utilisez des marqueurs de poids moléculaire appropriés. Optimisez le blocage et la dilution de l'anticorps selon votre type d'échantillon.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie, DHX9 est distribué à la fois dans les compartiments nucléaire et cytoplasmique. Validez les conditions de fixation/perméabilisation pour préserver l'accessibilité de l'antigène et envisagez d'utiliser des co-marquages pour les structures sous-cellulaires.
• Pour l'immunoprécipitation, utilisez des tampons de lyse optimisés contenant des inhibiteurs de protéases et de phosphatases pour préserver les interactions protéiques. Un contrôle négatif (par exemple, IgG de lapin) est indispensable.
• La performance en ELISA doit être calibrée avec de l'antigène purifié ou des lysats cellulaires, et la réactivité croisée avec d'autres hélicases à boîte DEAH peut être évaluée selon les exigences de spécificité de l'expérience.

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