Anticorps polyclonal de lapin anti-DHTKD1 pour WB et ELISA - Q96HY7

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DHTKD1

• DHTKD1 code pour la sous-unité E1a du complexe de la 2-oxoadipate déshydrogénase (OADHC), une enzyme mitochondriale qui catalyse la décarboxylation limitante du 2-oxoadipate (alpha-cétoadipate) en glutaryl-CoA et CO2. Références connexes : PMID:29191460, PMID:29752936, PMID:32303640, PMID:32695416

• Cette réaction est essentielle pour l'étape finale du catabolisme de la L-lysine, de la L-hydroxylysine et du L-tryptophane, reliant la dégradation des acides aminés au métabolisme énergétique mitochondrial.

• In vitro, DHTKD1 peut également décarboxyler le 2-oxoglutarate, bien qu'avec une efficacité nettement inférieure à celle de son substrat préféré, le 2-oxoadipate, démontrant une spécificité de substrat au sein de la famille des 2-oxoacide déshydrogénases. Références connexes : PMID:29191460, PMID:29752936, PMID:32633484

• La protéine réside dans la matrice mitochondriale et nécessite le pyrophosphate de thiamine (ThDP) comme cofacteur pour son activité catalytique.

• Les mutations de DHTKD1 sont associées à la maladie de Charcot-Marie-Tooth de type 2Q (CMT2Q) et à l'acidurie alpha-aminoadipique et alpha-cétoadipique (AMOXAD), soulignant son importance clinique dans la neurodégénérescence et les troubles métaboliques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le western blot, le poids moléculaire prédit est de 103 kDa ; envisagez d'utiliser un gel SDS-PAGE à 7,5-10 % pour une résolution optimale de cette protéine relativement grande.
• Comme l'anticorps est polyclonal et a été élevé contre un fragment recombinant (aa 1-280), il peut reconnaître plusieurs épitopes ; validez la spécificité en utilisant des lysats cellulaires de surexpression ou de knockdown/knockout.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec l'humain, la souris et le rat, comme indiqué par les données du fournisseur ; envisagez de valider dans l'espèce concernée en utilisant des lysats de tissus ou de cellules appropriés.
• Pour les applications ELISA, la titration de l'anticorps et l'optimisation des conditions de revêtement sont recommandées pour obtenir des rapports signal/bruit optimaux.
• Envisagez d'utiliser des protocoles d'enrichissement mitochondrial lors de l'analyse d'échantillons à faible abondance, car DHTKD1 est une protéine mitochondriale.

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