Anticorps Polyclonaux Anti-DHFR pour WB - P00374

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du DHFR

• Le DHFR catalyse la réduction dépendante du NADPH du 7,8-dihydrofolate en 5,6,7,8-tétrahydrofolate, une étape critique du métabolisme à un carbone. Références connexes : PMID:12096917 PMID:15039552 PMID:17569517
• Cette réaction est essentielle pour la synthèse de novo de la thymidylate, de la glycine et des purines, fournissant des précurseurs d'ADN pour les génomes nucléaires et mitochondriaux. Références connexes : PMID:21876188 PMID:22235121
• Le DHFR se localise dans le cytoplasme, les mitochondries et le noyau, soutenant le métabolisme des folates dans plusieurs compartiments cellulaires.
• L'enzyme est largement exprimée dans les tissus fœtaux et adultes, avec des niveaux plus élevés dans le cerveau adulte et le sang total.
• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes, et les mutations du DHFR sont associées à la résistance au méthotrexate et à des variantes pathologiques.
• Le DHFR se lie à son propre ARNm et à celui de DHFR2, indiquant un rôle régulateur potentiel dans l'expression génique post-transcriptionnelle.
• La protéine subit une ubiquitination et a été identifiée dans des criblages protéomiques à grande échelle.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène couvre le DHFR humain pleine longueur (aa 1-187), suggérant une réactivité potentielle avec la protéine native chez les espèces où l'homologie est élevée (confirmé pour l'humain et la souris). Validez dans votre système d'échantillon.
• Pour le Western blotting, attendez-vous à une bande à ~21 kDa. Optimisez les conditions de blocage et de détection, et incluez des contrôles de chargement appropriés.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, envisagez des protocoles de fixation et de perméabilisation qui préservent la localisation mitochondriale et nucléaire du DHFR.
• Lors de la réalisation d'ELISA, le DHFR exprimé de manière recombinante ou des lysats cellulaires peuvent servir d'antigènes ; la titration de l'anticorps est recommandée.
• L'expression du DHFR varie selon le tissu et le stade du cycle cellulaire ; incluez des contrôles positifs et négatifs pertinents dans vos expériences.
• En tant qu'anticorps polyclonal, évaluez la cohérence d'un lot à l'autre et envisagez d'utiliser un peptide bloquant pour confirmer la spécificité.

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