Anticorps monoclonal lapin anti-DGCR8 pour WB, ELISA - Q8WYQ5

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DGCR8

• Encodé par le gène DGCR8 (C22orf12, DGCRK6) sur le chromosome 22, DGCR8 est la sous-unité de liaison à l'ARN du complexe microprocesseur essentiel au traitement des miARN primaires.
• DGCR8 fonctionne comme une ancre moléculaire qui reconnaît la jonction ARNdb-ARNsb des pri-miARN et dirige DROSHA pour cliver précisément à 11 pb de distance, générant des épingles à cheveux pré-miARN.
  Références associées :
  PMID:15531877 PMID:15574589 PMID:15589161 PMID:26027739 PMID:26748718
• La liaison de l'hème à DGCR8 favorise la dimérisation et la formation d'un trimère coopératif qui améliore l'activité de clivage des pri-miARN, tandis que le monomère sans hème présente une activité plus faible.
• DGCR8 reconnaît spécifiquement les modifications N6-méthyladénosine (m6A) dans les pri-miARN, un déterminant critique pour un traitement efficace.
  Références associées :
  PMID:25799998
• Outre la biogenèse des miARN, DGCR8 participe à la réparation des cassures double-brin de l'ADN en facilitant le recrutement de RNF168 aux foyers de dommages à l'ADN.
  Références associées :
  PMID:34188037
• DGCR8 est principalement localisée dans le noyau et le nucléole, ce qui est cohérent avec ses rôles dans le traitement de l'ARN et la stabilité du génome.
• La protéine est exprimée de manière ubiquitaire et soumise à des modifications post-traductionnelles comprenant la phosphorylation, la formation de liaison isopeptidique et la conjugaison de type ubiquitine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Lors d'un Western blot, une bande d'environ 86 kDa est attendue ; validez la spécificité en utilisant un knock-down médié par siRNA ou des lysats surexprimant DGCR8.
• Pour l'ELISA, l'immunogène (acides aminés 436-764) peut servir de contrôle positif ; pensez à optimiser les conditions de revêtement et de détection dans la matrice d'échantillon concernée.
• Vérifiez la réactivité croisée chez l'homme et la souris comme indiqué ; pour les autres espèces, testez-la empiriquement en raison de la conservation de la séquence.
• Comme DGCR8 participe à des complexes protéiques dynamiques, des conditions natives ou dénaturantes douces peuvent être nécessaires pour préserver l'accessibilité des épitopes dans les applications basées sur l'immunoprécipitation.
• L'anticorps peut également convenir pour l'immunohistochimie ou l'immunofluorescence après validation ; envisagez des méthodes de démasquage antigénique appropriées pour les protéines nucléaires.

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