Anticorps polyclonal anti-DFFA pour WB, ELISA - O00273

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de DFFA

• Le DFFA, également connu sous le nom de sous-unité de 45 kDa du facteur de fragmentation de l'ADN (DFF-45) ou d'inhibiteur de la CAD (ICAD), est un régulateur clé de l'apoptose.
• Il agit comme un inhibiteur de l'ADNase activée par les caspases (DFF40/CAD), empêchant la fragmentation de l'ADN en l'absence de signaux apoptotiques.
• Après clivage par la caspase-3, le DFFA est inactivé, ce qui libère le DFF40 afin qu'il pénètre dans le noyau et réalise la fragmentation de l'ADN, une caractéristique de l'apoptose.
• Le DFFA est principalement localisé dans le cytoplasme, où il forme un complexe avec le DFF40 afin de maintenir celui-ci à l'état inactif.
• La protéine subit un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes susceptibles d'avoir des rôles régulateurs distincts.
• Les modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation et l'acétylation, peuvent moduler l'activité et la stabilité du DFFA.
• Le DFFA est impliqué dans les voies de mort cellulaire dépendantes et indépendantes des caspases, ce qui en fait une cible essentielle pour la recherche sur l'apoptose.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène, correspondant au DFFA humain de pleine longueur, couvre les acides aminés 1 à 331, soit la majeure partie de la protéine, ce qui peut permettre une détection robuste de la bande de 37 kDa en western blot.
• Pour le western blot, envisagez d'utiliser un contrôle positif tel que des lysats de cellules apoptotiques, dans lesquels le clivage par les caspases modifie les profils de migration du DFFA.
• Cet anticorps polyclonal peut reconnaître plusieurs isoformes du DFFA en raison de l'épissage alternatif ; validez la spécificité à l'aide de contrôles spécifiques des isoformes si nécessaire.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé dans des méthodes de détection directe ou indirecte ; optimisez les conditions de revêtement et de blocage en fonction de votre test spécifique.
• Une réactivité croisée avec le DFFA murin a été signalée ; vérifiez la cohérence des résultats dans vos systèmes expérimentaux.

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