Anticorps polyclonal anti-Desmoplakine pour WB, IHC-P, ELISA - P15924

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Desmoplakine

• La Desmoplakine (noms alternatifs : DP, DCWHKTA) est un composant majeur des jonctions intercellulaires desmosomales, obligatoire dans tous les desmosomes, et régule positivement l'adhésion cellulaire (PubMed:25733715). Références associées : PMID:25733715
• Elle ancre les filaments intermédiaires à la plaque desmosomale et organise le réseau de kératine, essentiel à l'intégrité de la barrière épidermique et dermique (PubMed:26604139). Références associées : PMID:26604139
• La Desmoplakine favorise la communication intracellulaire via les jonctions gap en facilitant le trafic microtubule-dépendant de GJA1/CX43 vers les membranes cellulaires via une interaction avec MAPRE1/EB1 (PubMed:25225338). Références associées : PMID:25225338
• La protéine régule négativement la progression du cycle cellulaire et la différenciation des kératinocytes, potentiellement en inhibant les voies MAPK et PI3K (PubMed:17475244). Références associées : PMID:17475244
• La Desmoplakine interagit avec le signalosome COP9, favorisant la différenciation des kératinocytes via la dénédylation de l'EGFR et une localisation membranaire réduite (PubMed:28891468). Références associées : PMID:28891468
• Elle est nécessaire au maintien de l'abondance protéique de plusieurs composants desmosomaux, notamment DSG1, DSG2, DSC2, DSC3 et les plakophilines (PubMed:17475244, PubMed:26073755). Références associées : PMID:17475244 PMID:26073755
• Le domaine C-terminal se lie à l'ADN télomérique et interagit avec TRF2 pour prévenir les dommages télomériques et maintenir la longueur des télomères (PubMed:31595153). Références associées : PMID:31595153
• La Desmoplakine est exprimée dans les tissus d'origine stratifiée, y compris les kératinocytes de la peau, la muqueuse buccale, le cœur et le muscle arrecteur du poil, et se localise aux desmosomes, à la membrane cellulaire, au cytoplasme et au noyau.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (aa 2609-2830) de la Desmoplakine humaine, qui contient un domaine de répétition plakine impliqué dans la liaison aux filaments intermédiaires et l'interaction avec l'ADN télomérique. Les anticorps ciblant cette région peuvent reconnaître la Desmoplakine pleine longueur et tout fragment C-terminal.
• Pour le Western blot, anticipez une bande proche du poids moléculaire prédit d'environ 332 kDa. Étant donné la grande taille, envisagez d'utiliser des gels SDS-PAGE à 6-8% et un transfert humide avec des temps de transfert prolongés (par exemple, toute la nuit à 30 V). Validez la spécificité de la bande en utilisant des contrôles appropriés.
• En immunohistochimie (IHC-P), une récupération antigénique (par exemple, tampon citrate, pH 6.0) et une perméabilisation tissulaire sont recommandées. Testez sur des tissus riches en desmosomes comme la peau ou le cœur, et confirmez la localisation aux jonctions intercellulaires.
• Pour l'ELISA, cet anticorps peut être utilisé pour détecter la protéine Desmoplakine recombinante ou purifiée. Optimisez les conditions de coating et de détection en fonction du format antigénique.
• La réactivité croisée signalée avec les espèces humaine, murine et rat doit être confirmée expérimentalement dans votre système de test spécifique, car l'homologie de séquence peut affecter la liaison.
• Compte tenu de la localisation subcellulaire dynamique de la Desmoplakine (desmosomes, cytoplasme, noyau), envisagez un fractionnement subcellulaire ou une co-marquage avec des marqueurs jonctionnels pour vérifier la spécificité de l'anticorps.

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