Anticorps polyclonal anti-DENND4A pour WB et ELISA - Q7Z401

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de DENND4A

• DENND4A, également connue sous les noms de protéine de liaison au promoteur de C-myc (MYCPBP) et d’IRLB, est une protéine contenant un domaine DENN qui agit comme facteur d’échange de nucléotides guanyliques (GEF) et régulateur transcriptionnel.
• Elle peut activer RAB10 en favorisant l’échange du GDP contre du GTP, convertissant ainsi les protéines Rab inactives liées au GDP en leur forme active liée au GTP.
• Elle se lie à l’élément de type ISRE (élément de réponse stimulé par l’interféron) du promoteur MYC P2, et peut ainsi réguler l’expression de MYC. Références associées : PMID:8056341
• La localisation subcellulaire est principalement nucléaire, ce qui est cohérent avec son rôle dans la régulation transcriptionnelle.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans la moelle osseuse, des niveaux intermédiaires dans les lymphocytes du sang périphérique et les niveaux les plus faibles dans la rate. Dans les tissus cérébraux, mammaires et prostatiques, l’expression est plus élevée dans les cellules normales que dans les cellules tumorales.
• Son expression est régulée en fonction de la croissance et du cycle cellulaire, ce qui suggère une implication dans le contrôle de la prolifération.
• La protéine subit un épissage alternatif et une phosphorylation, ajoutant plusieurs niveaux de régulation fonctionnelle.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de DENND4A est d’environ 209 kDa. Envisagez d’utiliser un gel de SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple, 6-8 %) et un temps de transfert suffisant afin d’assurer un transfert efficace des protéines de haut poids moléculaire.
• En tant qu’anticorps polyclonal, la constance entre les lots doit être validée. Incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés dans vos expériences afin de confirmer la spécificité.
• L’immunogène correspond aux acides aminés 1500-1650 de la protéine DENND4A humaine (NP_005839.3). Pour les expériences utilisant des échantillons murins, vérifiez l’homologie de séquence dans la région cible.
• Pour les applications ELISA, les concentrations optimales de revêtement et les conditions de détection doivent être déterminées empiriquement.
• Compte tenu de la localisation nucléaire de DENND4A, envisagez d’utiliser des lysats enrichis en fractions nucléaires pour améliorer la détection en WB.

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