Anticorps polyclonal de lapin anti-DEFB4A (Beta-defensine 2) pour WB, IF-P, ELISA - O15263

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DEFB4A (Beta-défensine 2)

• DEFB4A, également connue sous le nom de bêta-défensine 2 (BD-2, hBD-2), SAP1, DEFB2, DEFB4, DEFB102, est un membre de la famille des bêta-défensines de peptides antimicrobiens.
• Elle présente une activité antimicrobienne contre les bactéries à Gram négatif et à Gram positif, avec une activité maximale contre les bactéries à Gram négatif (PubMed:10837369, PubMed:9202117). Références associées : PMID:10837369, PMID:9202117
• Son activité antimicrobienne contre P. aeruginosa est sensible au sel et réduite dans des concentrations salines élevées supérieures à 25 mM (PubMed:10837369). Références associées : PMID:10837369
• Elle présente également une activité antifongique contre C. albicans, en perméabilisant les membranes cellulaires en ciblant le phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP2), un lipide de la membrane plasmique (PubMed:30050988, PubMed:10837369, PubMed:9202117). Références associées : PMID:30050988, PMID:10837369, PMID:9202117
• Elle agit comme ligand pour le récepteur de chimiokine C-C CCR6, induisant la chimiotaxie des cellules dendritiques immatures et des lymphocytes T mémoires (PubMed:10521347, PubMed:20068036). Références associées : PMID:10521347, PMID:20068036
• DEFB4A est une protéine sécrétée, détectable dans le liquide de revêtement épithélial et les espaces extracellulaires.
• Elle est exprimée majoritairement dans les cellules épithéliales pulmonaires, le prépuce, le poumon et la trachée, avec une expression plus faible dans le rein, l'utérus et la glande salivaire (PubMed:10837369, PubMed:9202117, PubMed:9831658). Références associées : PMID:10837369, PMID:9202117, PMID:9831658
• Elle contient des résidus de cystéine conservés formant des ponts disulfures intramoléculaires, caractéristiques des défensines, qui contribuent à la stabilité structurelle et à la fonction antimicrobienne.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 1 à 64 de la DEFB4A humaine, qui couvre la région N-terminale incluant le peptide signal. Il faut considérer que l'anticorps peut reconnaître les formes précurseur et/ou matures ; une validation dans les systèmes biologiques concernés est recommandée.
• Pour le Western blot (WB), en raison de la faible masse moléculaire d'environ 7 kDa, utilisez un gel de polyacrylamide à haut pourcentage (par exemple 15 % ou un gel à gradient) et optimisez soigneusement les conditions de transfert pour éviter un transfert excessif. Les contrôles positifs peuvent inclure des lysats de cellules épithéliales pulmonaires ou trachéales humaines.
• En immunofluorescence sur coupes incluses en paraffine (IF-P), attendez-vous à des motifs de coloration extracellulaire ou vésiculaire, car DEFB4A est une protéine sécrétée. La perméabilisation peut être ajustée ; incluez des contrôles appropriés.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour détecter la DEFB4A native ou recombinante dans des fluides biologiques tels que le lavage bronchoalvéolaire ou les surnageants de culture cellulaire. Le couplage avec un anticorps de capture peut être exploré pour développer un ELISA sandwich.
• Cet anticorps réagit avec la DEFB4A humaine ; la réactivité croisée avec d'autres espèces ou d'autres membres de la famille des défensines n'a pas été testée selon les données disponibles. Validez la spécificité dans votre système d'échantillons.

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