Anticorps polyclonal anti-DDX5 pour WB, ELISA - P17844

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DDX5

• DDX5, également appelée p68 RNA hélicase, est un membre de la famille des protéines de la boîte DEAD, caractérisée par une activité ARN hélicase dépendante de l'ATP essentielle à la modulation de la structure secondaire de l'ARN.
• Intervient dans l'épissage alternatif des pré-ARNm : son activité hélicase favorise l'inclusion de l'exon 10 du tau d'une manière dépendante de RBM4, en se liant à la région de la boucle en épingle en aval de l'exon 10.
• Agit comme coactivateur transcriptionnel pour de multiples facteurs de transcription, notamment le récepteur aux androgènes (AR), MYOD1 (en synergie avec DDX17 et l'ARN SRA1), p53/TP53 (impliqué dans la réponse aux dommages de l'ADN et l'apoptose), et RUNX2 (régulant la différenciation des ostéoblastes).
• De plus, il peut fonctionner comme répresseur transcriptionnel de manière spécifique au promoteur, probablement par association avec des désacétylases d'histones telles que HDAC1.
• En tant que composant du complexe PER, DDX5 inhibe la terminaison transcriptionnelle 3' des gènes cibles circadiens (par ex. PER1, NR1D1), contribuant à la régulation du rythme circadien.
• La localisation sous-cellulaire est principalement nucléaire, incluant le nucléole et les speckles nucléaires, mais il est également détecté dans le cytoplasme.
• Il est soumis à diverses modifications post-traductionnelles : acétylation, phosphorylation et ubiquitination (conjugaison Ubl), qui peuvent réguler son activité et ses interactions.

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour le Western blot (WB), attendez une bande spécifique à environ 69 kDa. Utilisez des conditions standard de SDS-PAGE et de transfert, et envisagez une validation avec des lysats de knock-down de DDX5 ou des contrôles de protéines recombinantes.
• L'immunogène couvre la séquence des acides aminés 1 à 614 de l'extrémité N-terminale ; par conséquent, l'anticorps peut reconnaître la DDX5 de pleine longueur et des isoformes potentielles. Vérifiez la spécificité dans votre système expérimental.
• La réactivité croisée avec la souris permet des études translationnelles interspécifiques ; validez sur des tissus ou des lignées cellulaires de souris pertinents pour confirmer la réactivité.
• Pour l'ELISA, optimisez les concentrations de revêtement et les méthodes de détection ; l'anticorps peut être utilisé pour des contrôles de titre ou des essais de capture d'antigène.
• Compte tenu des rôles de DDX5 dans l'épissage et la transcription, des applications fonctionnelles comme l'immunoprécipitation de l'ARN (RIP) ou la co-immunoprécipitation (Co-IP) peuvent être envisagées, mais des tests empiriques sont recommandés.
• En tant qu'anticorps polyclonal, surveillez la cohérence entre lots en incluant des contrôles positifs et négatifs dans chaque expérience.

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